
- Væv
- Livmoderhalsen
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b, HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
Dokumenter
HK EGFP-Kleisin-beta
Cell line · Varenummer 300674
The HK EGFP-Kleisin-beta cell line represents a genetically modified variant of Hela Kyoto cells designed primarily for the study of chromosome cohesion d...
Tilpasning / Anbefalinger
- HK EGFP-Kleisin-betaCell line€800.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
HK EGFP-Kleisin-beta-cellelinjen repræsenterer en genetisk modificeret variant af Hela Kyoto-celler, der primært er designet til undersøgelse af kromosomkohæsion under cellecyklussen. Denne cellelinje udtrykker et forstærket grønt fluorescerende protein (EGFP), der er fusioneret med Kleisin-beta-proteinet, en afgørende komponent i cohesin-komplekset, der er afgørende for søsterkromatid-kohæsion. Udtrykket af EGFP-mærket Kleisin-beta giver mulighed for realtidsvisualisering af kohesindynamik og lokalisering gennem hele cellecyklussen, hvilket letter detaljerede analyser af kromosomstruktur og -funktion i en cellulær kontekst.
Denne cellemodel bruges typisk i forskning med fokus på mekanismerne for mitotisk og meiotisk kromosomadskillelse, hvor man især ser på, hvordan cohesins regulering påvirker den genetiske stabilitet og celledelingen. Den fluorescerende mærkning af Kleisin-beta gør det muligt at undersøge dens interaktion med andre cohesin-komponenter og kromosomproteiner, hvilket giver indsigt i den rumlige og tidsmæssige samling af cohesin på kromosomer. Brugen af denne cellelinje strækker sig til undersøgelser af genetiske lidelser og kræftformer, hvor cohesin-funktionen er forstyrret, hvilket giver et værdifuldt værktøj til at forstå patogenesen og udvikle terapeutiske strategier.
- Væv
- Livmoderhalsen
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b
- HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-kleisin-beta construct for live-cell studies of cohesin and chromosome architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epithel-lignende celler med mosaikstenform
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HK EGFP-Kleisin-beta (Cytion katalognummer 300674)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D64
- Indskyder
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- EGFP-Kleisin-β: Placering/gen: 1..589 / Pcmv, 619..645 / Flag-tag, 661..1368 / GFP, 1393..3206 / Kleisin Beta, 4474..5268 KanR/NeoR
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 1 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 30 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Afroamerikaner
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)