.jpg)
- Væv
- Livmoderhalsen
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- HeLa Kyoto H2B-EGFP, HeLa Kyoto H2B EGFP, HeLa-H2B-GFP
Dokumenter
HK EGFP-H2B
Cell line · Varenummer 300673
The HK EGFP-H2B cell line is a genetically modified Hela Kyoto cell line used primarily for the study of chromatin dynamics and nuclear processes. This ce...
Tilpasning / Anbefalinger
- HK EGFP-H2BCell line€800.00
Anbefalet (det nyeste parti)
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
HK EGFP-H2B-cellelinjen er en genetisk modificeret Hela Kyoto-cellelinje, der primært anvendes til undersøgelse af kromatin-dynamik og nukleare processer. Denne cellelinje udtrykker et fusionsprotein bestående af Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) og histon H2B. Integrationen af EGFP i H2B-proteinet giver mulighed for realtidsvisualisering af kromatin i levende celler under fluorescensmikroskopi, hvilket giver værdifuld indsigt i den rumlige og tidsmæssige organisering af kernen.
EGFP-H2B-fusionen muliggør mange anvendelser inden for cellebiologi, herunder undersøgelse af cellecyklusprogression, mitose og regulering af genekspression. Ved at observere fluorescensmønstrene kan forskere identificere og analysere faser i cellecyklussen, kromosomopdeling og strukturelle ændringer i kernen. Denne cellelinje stammer fra voksne menneskeceller, hvilket sikrer relevans for den menneskelige biologi, og den bruges både i biologisk grundforskning og i mere anvendte farmaceutiske undersøgelser.
Derudover fungerer HK EGFP-H2B-cellelinjen som et afgørende værktøj i epigenetisk forskning. Evnen til direkte at observere histonadfærd hjælper med at forstå de epigenetiske mekanismer, der ligger til grund for genekspression og -dæmpning, samt virkningerne af forskellige epigenetiske modifikatorer. Cellelinjens robuste anvendelse i live-celle billeddannelseseksperimenter gør den uundværlig til detaljerede undersøgelser, der kræver dynamisk cellulær analyse.
- Væv
- Livmoderhalsen
- Sygdom
- Karcinom
- Synonymer
- HeLa Kyoto H2B-EGFP
- HeLa Kyoto H2B EGFP
- HeLa-H2B-GFP
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Kvinde
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- GMO-status
- GMO-S1
- Oplysninger om GMO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-H2B construct allowing real-time visualization of chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Morfologi
- Epithel-lignende celler med mosaikstenform
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HK EGFP-H2B (Cytion katalognummer 300673)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D63
- Indskyder
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Udtryk og modtagelighed
- Proteinekspression
- EGFP-H2B: Placering/gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
- Produkter
- CMV-promotor, histon H2B, neomycin, fosfotransferase
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Såtæthed
- 1 x 104 celler/cm2
- Væskeudskiftning
- 2 til 3 gange om ugen
- Genopretning efter optøning
- Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- 30 år
- Etnisk tilhørsforhold
- Afroamerikaner
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der gælder aftaler med tredjeparter
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)

.jpg)
.jpg)
.jpg)