.jpg)
- Tisu
- Serviks
- Penyakit
- Karsinoma
- Sinonim
- HeLa Kyoto H2B-EGFP, HeLa Kyoto H2B EGFP, HeLa-H2B-GFP
Dokumen
HK EGFP-H2B
Cell line · Nomor produk 300673
The HK EGFP-H2B cell line is a genetically modified Hela Kyoto cell line used primarily for the study of chromatin dynamics and nuclear processes. This ce...
Penyesuaian / Rekomendasi
- HK EGFP-H2BCell line€800.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Garis sel HK EGFP-H2B adalah garis sel Hela Kyoto yang dimodifikasi secara genetik yang digunakan terutama untuk mempelajari dinamika kromatin dan proses nuklir. Garis sel ini mengekspresikan protein fusi yang terdiri dari Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) dan histon H2B. Integrasi EGFP ke dalam protein H2B memungkinkan visualisasi kromatin secara real-time dalam sel hidup di bawah mikroskop fluoresensi, memberikan wawasan yang berharga ke dalam organisasi spasial dan temporal nukleus.
Fusi EGFP-H2B memfasilitasi berbagai aplikasi dalam biologi sel, termasuk studi tentang perkembangan siklus sel, mitosis, dan regulasi ekspresi gen. Dengan mengamati pola fluoresensi, para peneliti dapat mengidentifikasi dan menganalisis fase siklus sel, pemisahan kromosom, dan perubahan struktural di dalam nukleus. Garis sel ini berasal dari sel manusia dewasa, memastikan relevansi dengan biologi manusia, dan digunakan dalam penelitian biologi dasar dan studi farmasi yang lebih terapan.
Selain itu, garis sel HK EGFP-H2B berfungsi sebagai alat penting dalam penelitian epigenetik. Kemampuan untuk secara langsung mengamati perilaku histon membantu dalam memahami mekanisme epigenetik yang mendasari ekspresi dan pembungkaman gen, serta efek dari berbagai pengubah epigenetik. Aplikasi garis sel yang kuat dalam eksperimen pencitraan sel hidup membuatnya sangat diperlukan untuk studi terperinci yang membutuhkan analisis seluler dinamis.
- Tisu
- Serviks
- Penyakit
- Karsinoma
- Sinonim
- HeLa Kyoto H2B-EGFP
- HeLa Kyoto H2B EGFP
- HeLa-H2B-GFP
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- GMO-S1
- Rincian status GMO
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-H2B construct allowing real-time visualization of chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Sel mirip epitel dengan bentuk batu mosaik
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HK EGFP-H2B (Nomor katalog Cytion 300673)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D63
- Nasabah penyimpanan
- Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi protein
- EGFP-H2B: Lokasi/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR / NeoR
- Produk
- Promotor CMV, Histone H2B, Neomisin, Fosfotransferase
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 30 tahun
- Etnis
- Afrika-Amerika
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Berlaku ketentuan perjanjian pihak ketiga
- Ya
.jpg)
.jpg)
.jpg)

.jpg)
.jpg)
.jpg)