Skip to content
HK EGFP-H2B
Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô
Synonyms
HeLa Kyoto H2B-EGFP, HeLa Kyoto H2B EGFP, HeLa-H2B-GFP

Documents

HK EGFP-H2B

Cell line · Product number 300673

The HK EGFP-H2B cell line is a genetically modified Hela Kyoto cell line used primarily for the study of chromatin dynamics and nuclear processes. This ce...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

Dòng tế bào HK EGFP-H2B là một dòng tế bào Hela Kyoto được biến đổi gen, chủ yếu được sử dụng để nghiên cứu động học của chromatin và các quá trình trong nhân tế bào. Dòng tế bào này biểu hiện một protein liên hợp gồm Protein Phát Quang Xanh Tăng Cường (EGFP) và histone H2B. Việc tích hợp EGFP vào protein H2B cho phép quan sát trực tiếp chromatin trong tế bào sống dưới kính hiển vi phát quang, cung cấp những hiểu biết quý giá về tổ chức không gian và thời gian của nhân tế bào.

Protein hợp nhất EGFP-H2B hỗ trợ nhiều ứng dụng trong sinh học tế bào, bao gồm nghiên cứu tiến trình chu kỳ tế bào, phân bào và điều hòa biểu hiện gen. Bằng cách quan sát các mẫu huỳnh quang, các nhà nghiên cứu có thể xác định và phân tích các giai đoạn của chu kỳ tế bào, sự phân chia nhiễm sắc thể và các thay đổi cấu trúc bên trong nhân. Dòng tế bào này được phân lập từ tế bào người trưởng thành, đảm bảo tính liên quan đến sinh học người, và được sử dụng trong cả nghiên cứu sinh học cơ bản lẫn các nghiên cứu dược phẩm ứng dụng.

Ngoài ra, dòng tế bào HK EGFP-H2B còn là công cụ quan trọng trong nghiên cứu di truyền học biểu sinh. Khả năng quan sát trực tiếp hành vi của histone giúp hiểu rõ các cơ chế di truyền học biểu sinh điều chỉnh biểu hiện và ức chế gen, cũng như tác động của các chất điều chỉnh di truyền học biểu sinh khác nhau. Ứng dụng mạnh mẽ của dòng tế bào này trong các thí nghiệm hình ảnh tế bào sống khiến nó trở thành công cụ không thể thiếu cho các nghiên cứu chi tiết yêu cầu phân tích tế bào động.

Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô
Synonyms
  • HeLa Kyoto H2B-EGFP
  • HeLa Kyoto H2B EGFP
  • HeLa-H2B-GFP

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-H2B construct allowing real-time visualization of chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào có hình dạng giống biểu mô với cấu trúc dạng đá mozaic

04Identifiers

Citation
HK EGFP-H2B (Số catalog của Cytion: 300673)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1D63
Depositor
Phòng thí nghiệm Ellenberg (EMBL)

05Expression and susceptibility

Protein expression
EGFP-H2B: Vị trí/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
Products
CMV Promotor, Histone H2B, Neomycin, Phosphotransferase

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
30 năm
Ethnicity
Người Mỹ gốc Phi