Gå direkt till innehållet
HK EGFP-H2B
Vävnad
Cervix
Sjukdom
Carcinom
Synonymer
HeLa Kyoto H2B-EGFP, HeLa Kyoto H2B EGFP, HeLa-H2B-GFP

HK EGFP-H2B

Cell line · Produktnummer 300673

The HK EGFP-H2B cell line is a genetically modified Hela Kyoto cell line used primarily for the study of chromatin dynamics and nuclear processes. This ce...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Lågt lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

HK EGFP-H2B-cellinjen är en genetiskt modifierad Hela Kyoto-cellinje som främst används för studier av kromatindynamik och nukleära processer. Denna cellinje uttrycker ett fusionsprotein som består av Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) och histon H2B. Integrationen av EGFP i H2B-proteinet möjliggör realtidsvisualisering av kromatin i levande celler under fluorescensmikroskopi, vilket ger värdefulla insikter i den rumsliga och tidsmässiga organisationen av kärnan.

EGFP-H2B-fusionen underlättar många tillämpningar inom cellbiologi, bland annat studier av cellcykelförlopp, mitos och reglering av genuttryck. Genom att observera fluorescensmönstren kan forskare identifiera och analysera faser i cellcykeln, kromosomsegregering och strukturella förändringar i cellkärnan. Denna cellinje härrör från celler från vuxna människor, vilket säkerställer relevansen för humanbiologi, och används både inom biologisk grundforskning och mer tillämpade farmaceutiska studier.

Dessutom fungerar HK EGFP-H2B-cellinjen som ett viktigt verktyg inom epigenetisk forskning. Möjligheten att direkt observera histonernas beteende bidrar till förståelsen av de epigenetiska mekanismer som ligger bakom genuttryck och avstängning av gener, samt effekterna av olika epigenetiska modifierare. Cellinjens robusta tillämpning i live-cell imaging-experiment gör den oumbärlig för detaljerade studier som kräver dynamisk cellulär analys.

Vävnad
Cervix
Sjukdom
Carcinom
Synonymer
  • HeLa Kyoto H2B-EGFP
  • HeLa Kyoto H2B EGFP
  • HeLa-H2B-GFP

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-H2B construct allowing real-time visualization of chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande celler med mosaikstensform

04Identifierare

Källa
HK EGFP-H2B (Cytion katalognummer 300673)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1D63
Insättare
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
EGFP-H2B: Plats/Gen: 1..589 / Pcmv, 613..1329 / EGFP, 1387..1764 / H2B, 3001..3795 / KanR/NeoR
Produkter
CMV Promotor, Histon H2B, Neomycin, Fosfotransferas

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
30 år
Etnicitet
Afroamerikan