HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry-cellinjen är en in vitro-modell som härrör från Hela Kyoto och är utformad för realtidsvisualisering av kromatindynamik och kärnarkitektur i levande celler. Denna cellinje uttrycker två fluorescerande proteinfusioner: EGFP (förstärkt grönt fluorescerande protein) fusionerat med Lamin B1 och mCherry (ett rött fluorescerande protein) fusionerat med histon H2B. Fusionen av EGFP med Lamin B1 gör det möjligt att observera kärnhöljet och kärnlamina, strukturer som är avgörande för att upprätthålla kärnans integritet och funktionalitet. Laminproteiner är intermediära filamentproteiner av typ V som bildar ett nätverk under det inre kärnmembranet och spelar nyckelroller i kärnstabilitet, kromatinorganisation och genreglering.

Å andra sidan möjliggör den mCherry-märkta histonen H2B visualisering av kromatin i kärnan. Histoner är grundläggande komponenter i nukleosomen, som är involverad i organiseringen av DNA i kromatin, vilket gör dem avgörande för DNA-replikation, reparation och transkription. MCherry-taggen på H2B ger en livlig röd fluorescens som kontrasterar mot den gröna fluorescensen hos EGFP, vilket möjliggör samtidig dubbelavbildning av kärnstrukturen och kromatin i experiment med levande celler. Denna cellinje används ofta i studier som fokuserar på kärnmekanik, mitos och genomstabilitet, vilket ger en dynamisk bild av cellulära processer som annars är svåra att observera i realtid.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring