HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

A HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry sejtvonal egy Hela Kiotóból származó in vitro modell, amelyet a kromatin dinamikájának és a nukleáris architektúrának élő sejtekben történő valós idejű vizualizálására terveztek. Ez a sejtvonal két fluoreszcens fehérjefúziót expresszál: (megerősített zöld fluoreszcens fehérje), amely Lamin B1-gyel fuzionált, és mCherry-t (vörös fluoreszcens fehérje), amely hiszton H2B-vel fuzionált. Az EGFP és a Lamin B1 fúziója lehetővé teszi a sejtmag burkának és a nukleáris lamina megfigyelését, amelyek a sejtmag integritásának és funkcionalitásának fenntartása szempontjából kritikus struktúrák. A lamin fehérjék V. típusú intermedier filamentum fehérjék, amelyek a belső magmembrán alatti hálót alkotják, és kulcsszerepet játszanak a nukleáris stabilitásban, a kromatin szerveződésében és a génszabályozásban.

Másrészt az mCherry-taggal jelölt H2B hiszton lehetővé teszi a kromatin vizualizálását a sejtmagon belül. A hisztonok a nukleoszóma alapvető összetevői, amelyek részt vesznek a DNS kromatinba szerveződésében, így létfontosságúak a DNS-replikáció, a javítás és az átírás szempontjából. A H2B mCherry tag élénk vörös fluoreszcenciát biztosít, amely kontrasztban áll az EGFP zöld fluoreszcenciájával, lehetővé téve a nukleáris szerkezet és a kromatin egyidejű kettős képalkotását élő sejtes kísérletekben. Ezt a sejtvonalat gyakran használják a nukleáris mechanikára, a mitózisra és a genom stabilitására összpontosító vizsgálatokban, dinamikus képet nyújtva olyan sejtfolyamatokról, amelyeket egyébként nehéz valós időben megfigyelni.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban