HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry šūnu līnija ir no Hela Kyoto atvasināts in vitro modelis, kas paredzēts hromatīna dinamikas un kodola arhitektūras vizualizēšanai reāllaikā dzīvās šūnās. Šī šūnu līnija ekspresē divas fluorescējošu proteīnu fusion: EGFP (pastiprināts zaļais fluorescējošais proteīns), kas saplūst ar lamīnu B1, un mCherry (sarkanais fluorescējošais proteīns), kas saplūst ar histonu H2B. EGFP saplūšana ar lamīnu B1 ļauj novērot kodola apvalku un kodola plāksnīti - struktūras, kas ir ļoti svarīgas kodola integritātes un funkcionalitātes saglabāšanai. Lamīna olbaltumvielas ir V tipa starpposma pavedienu olbaltumvielas, kas veido tīklojumu zem iekšējās kodola membrānas, un tām ir būtiska nozīme kodola stabilitātē, hromatīna organizācijā un gēnu regulācijā.

No otras puses, ar mCherry marķēts histons H2B ļauj vizualizēt hromatīnu kodolā. Histoni ir nukleosomu pamatkomponenti, kas piedalās DNS organizēšanā hromatīnā, padarot tos par būtiskiem DNS replikācijas, labošanas un transkripcijas procesos. H2B mCherry marķējums nodrošina spilgti sarkanu fluorescenci, kas kontrastē ar EGFP zaļo fluorescenci, ļaujot vienlaicīgi divējādi attēlot kodola struktūru un hromatīnu eksperimentos ar dzīvām šūnām. Šo šūnu līniju parasti izmanto pētījumos, kas vērsti uz kodola mehāniku, mitozi un genoma stabilitāti, sniedzot dinamisku priekšstatu par šūnu procesiem, kurus citādi ir grūti novērot reālajā laikā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu