HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

Клетъчната линия HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry е in vitro модел, получен от Hela Kyoto, предназначен за визуализиране в реално време на динамиката на хроматина и ядрената архитектура в живи клетки. Тази клетъчна линия експресира две флуоресцентни протеинови сливания: EGFP (подобрен зелен флуоресцентен протеин), слят с Ламин В1, и mCherry (червен флуоресцентен протеин), слят с хистон H2B. Сливането на EGFP с Ламин В1 позволява да се наблюдават ядрената обвивка и ядрената пластинка - структури, които са от решаващо значение за поддържане на целостта и функционалността на ядрото. Ламиновите протеини са междинни нишковидни протеини от тип V, които образуват мрежа под вътрешната ядрена мембрана и играят ключова роля в ядрената стабилност, организацията на хроматина и генната регулация.

От друга страна, маркираният с mCherry хистон H2B дава възможност за визуализиране на хроматина в ядрото. Хистоните са основни компоненти на нуклеозомата, участващи в организирането на ДНК в хроматин, което ги прави изключително важни за репликацията, възстановяването и транскрипцията на ДНК. Тагът mCherry на H2B осигурява ярка червена флуоресценция, която контрастира със зелената флуоресценция на EGFP, позволявайки едновременно двойно изобразяване на ядрената структура и хроматина при експерименти с живи клетки. Тази клетъчна линия обикновено се използва в изследвания, насочени към ядрената механика, митозата и стабилността на генома, като осигурява динамичен поглед върху клетъчните процеси, които иначе е трудно да се наблюдават в реално време.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация