HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

De HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry cellijn is een Hela Kyoto afgeleid in vitro model ontworpen voor real-time visualisatie van chromatine dynamiek en nucleaire architectuur in levende cellen. Deze cellijn brengt twee fluorescerende eiwitfusies tot expressie: EGFP (verbeterd groen fluorescerend eiwit) samengevoegd met Lamin B1, en mCherry (een rood fluorescerend eiwit) samengevoegd met histon H2B. De fusie van EGFP met Lamin B1 maakt de observatie mogelijk van de nucleaire envelop en de nucleaire lamina, structuren die cruciaal zijn voor het behoud van de integriteit en functionaliteit van de kern. Lamin-eiwitten zijn type V intermediaire filamenteiwitten die een netwerk vormen onder het binnenste kernmembraan en een sleutelrol spelen in de nucleaire stabiliteit, de organisatie van het chromatine en de genregulatie.

Aan de andere kant maakt het mCherry-gemerkte histon H2B de visualisatie van chromatine in de celkern mogelijk. Histonen zijn fundamentele componenten van het nucleosoom, betrokken bij de organisatie van DNA in chromatine, waardoor ze cruciaal zijn voor DNA replicatie, reparatie en transcriptie. De mCherry-tag op H2B zorgt voor een levendige rode fluorescentie die contrasteert met de groene fluorescentie van EGFP, waardoor gelijktijdige dubbele beeldvorming van de nucleaire structuur en chromatine in live-celexperimenten mogelijk is. Deze cellijn wordt vaak gebruikt in studies die zich richten op nucleaire mechanica, mitose en genoomstabiliteit, en biedt een dynamisch beeld van cellulaire processen die anders moeilijk in realtime te observeren zijn.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring