HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

Η κυτταρική σειρά HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry είναι ένα in vitro μοντέλο Hela Kyoto που έχει σχεδιαστεί για την οπτικοποίηση της δυναμικής της χρωματίνης και της πυρηνικής αρχιτεκτονικής σε ζωντανά κύτταρα σε πραγματικό χρόνο. Αυτή η κυτταρική σειρά εκφράζει δύο συγχωνεύσεις φθορίζουσας πρωτεΐνης: Και mCherry (κόκκινη φθορίζουσα πρωτεΐνη), η οποία είναι συγχωνευμένη με την ιστόνη H2B. Η σύντηξη της EGFP με το Lamin B1 επιτρέπει την παρατήρηση του πυρηνικού περιβλήματος και του πυρηνικού ελάσματος, δομές κρίσιμες για τη διατήρηση της ακεραιότητας και της λειτουργικότητας του πυρήνα. Οι πρωτεΐνες Lamin είναι πρωτεΐνες ενδιάμεσων νηματίων τύπου V που σχηματίζουν ένα πλέγμα που βρίσκεται κάτω από την εσωτερική πυρηνική μεμβράνη, διαδραματίζοντας βασικούς ρόλους στην πυρηνική σταθερότητα, την οργάνωση της χρωματίνης και τη γονιδιακή ρύθμιση.

Από την άλλη πλευρά, η σημασμένη με mCherry ιστόνη H2B επιτρέπει την οπτικοποίηση της χρωματίνης εντός του πυρήνα. Οι ιστόνες είναι θεμελιώδη συστατικά του νουκλεοσώματος, που εμπλέκονται στην οργάνωση του DNA στη χρωματίνη, καθιστώντας τις ζωτικής σημασίας για την αντιγραφή, την επιδιόρθωση και τη μεταγραφή του DNA. Η ετικέτα mCherry στην H2B παρέχει έναν ζωηρό κόκκινο φθορισμό που έρχεται σε αντίθεση με τον πράσινο φθορισμό της EGFP, επιτρέποντας την ταυτόχρονη διπλή απεικόνιση της πυρηνικής δομής και της χρωματίνης σε πειράματα με ζωντανά κύτταρα. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται συνήθως σε μελέτες που επικεντρώνονται στην πυρηνική μηχανική, τη μίτωση και τη σταθερότητα του γονιδιώματος, παρέχοντας μια δυναμική εικόνα των κυτταρικών διεργασιών που διαφορετικά είναι δύσκολο να παρατηρηθούν σε πραγματικό χρόνο.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης