HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry

Die HK EGFP-LaminB1/H2B-mCherry-Zelllinie ist ein von Hela Kyoto abgeleitetes In-vitro-Modell, das für die Echtzeit-Visualisierung der Chromatindynamik und Kernarchitektur in lebenden Zellen entwickelt wurde. Diese Zelllinie exprimiert zwei fluoreszierende Proteinfusionen: EGFP (enhanced green fluorescent protein), das mit Lamin B1 fusioniert ist, und mCherry (ein rot fluoreszierendes Protein), das mit Histon H2B fusioniert ist. Die Fusion von EGFP mit Lamin B1 ermöglicht die Beobachtung der Kernhülle und der Kernlamina, Strukturen, die für die Aufrechterhaltung der Integrität und Funktionalität des Zellkerns entscheidend sind. Lamin-Proteine sind Proteine des Typs V der Intermediärfilamente, die ein Geflecht unter der inneren Kernmembran bilden und eine Schlüsselrolle bei der Kernstabilität, der Chromatinorganisation und der Genregulation spielen.

Andererseits ermöglicht das mit mCherry markierte Histon H2B die Visualisierung des Chromatins innerhalb des Zellkerns. Histone sind grundlegende Bestandteile des Nukleosoms, die an der Organisation der DNA in Chromatin beteiligt sind und somit eine entscheidende Rolle bei der DNA-Replikation, -Reparatur und -Transkription spielen. Der mCherry-Tag auf H2B sorgt für eine lebhafte rote Fluoreszenz, die mit der grünen Fluoreszenz von EGFP kontrastiert und die gleichzeitige Darstellung der Kernstruktur und des Chromatins bei Experimenten in lebenden Zellen ermöglicht. Diese Zelllinie wird häufig in Studien zur Kernmechanik, Mitose und Genomstabilität eingesetzt und ermöglicht einen dynamischen Blick auf zelluläre Prozesse, die sonst nur schwer in Echtzeit zu beobachten sind.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung