.jpg)
- Ιστός
- Τράχηλος μήτρας
- Ασθένεια
- Καρκίνωμα
- Συνώνυμα
- HeLa Kyoto Mad2-LAP and H2B-mCherry, HeLa Kyoto Mad2-LAP
Έγγραφα
HK Mad2-LAP/H2B-mCherry
Cell line · Αριθμός προϊόντος 300920
The HK Mad2-LAP/H2B-mCherry cell line is a genetically engineered cell model extensively utilized for studying chromosome segregation and the spindle asse...
Προσαρμογή / Προτάσεις
- HK Mad2-LAP/H2B-mCherryCell line€800.00
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Η κυτταρική σειρά HK Mad2-LAP/H2B-mCherry είναι ένα γενετικά τροποποιημένο κυτταρικό μοντέλο που χρησιμοποιείται ευρέως για τη μελέτη του διαχωρισμού των χρωμοσωμάτων και του σημείου ελέγχου συναρμολόγησης της ατράκτου κατά τη μίτωση. Τα κύτταρα αυτά προέρχονται από τα κύτταρα HeLa Kyoto, μια ισχυρή ανθρώπινη κυτταρική σειρά που προέρχεται αρχικά από καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας. Η πτυχή HK Mad2-LAP (LAP-tagged Mad2) της κυτταρικής σειράς διευκολύνει την οπτικοποίηση και τη λειτουργική ανάλυση της πρωτεΐνης Mad2, ενός κρίσιμου συστατικού του σημείου ελέγχου συναρμολόγησης της ατράκτου που εμποδίζει την έναρξη της ανάφασης έως ότου όλα τα χρωμοσώματα ευθυγραμμιστούν σωστά στην πλάκα μετάφασης.
Η ενσωμάτωση της H2B-mCherry, όπου η ιστόνη H2B επισημαίνεται με τη φθορίζουσα πρωτεΐνη mCherry, επιτρέπει την απεικόνιση σε πραγματικό χρόνο της δυναμικής της χρωματίνης κατά τη διάρκεια της κυτταρικής διαίρεσης. Αυτό το χαρακτηριστικό καθιστά την κυτταρική σειρά HK Mad2-LAP/H2B-mCherry ένα εξαιρετικό εργαλείο για τεχνικές απεικόνισης ζωντανών κυττάρων υψηλής ανάλυσης για την παρατήρηση των χρωμοσωμικών κινήσεων και της μιτωτικής εξέλιξης σε ανθρώπινα κύτταρα υπό διάφορες πειραματικές συνθήκες. Η χρήση φθορίζουσων ετικετών βοηθά στην ακριβή παρακολούθηση και ποσοτικοποίηση, παρέχοντας έτσι πολύτιμες πληροφορίες για τους μοριακούς μηχανισμούς που διέπουν τη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και τη χρωμοσωμική σταθερότητα.
- Ιστός
- Τράχηλος μήτρας
- Ασθένεια
- Καρκίνωμα
- Συνώνυμα
- HeLa Kyoto Mad2-LAP and H2B-mCherry
- HeLa Kyoto Mad2-LAP
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Άνθρωπος
- Σεξ
- Γυναίκα
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
- GMO-S1
- Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains Mad2-LAP and H2B-mCherry constructs enabling visualization of spindle checkpoint dynamics. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Επιθηλιακά κύτταρα με ψηφιδωτό σχήμα πέτρας
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- HK Mad2-LAP/H2B-mCherry (αριθμός καταλόγου Cytion 300920)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 9606
- Κελλοσαύρος
- CVCL_1D65
- Καταθέτης
- Εργαστήριο Ellenberg (EMBL)
05Έκφραση και ευαισθησία
- Έκφραση πρωτεϊνών
- Mad2-LAP/H2B-mCherry
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
- Πυκνότητα σποράς
- 1 x 104 κύτταρα/cm2
- Ανανέωση υγρών
- 2 έως 3 φορές την εβδομάδα
- Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
- Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Ηλικία δωρητή
- 30 χρόνια
- Εθνικότητα
- Αφροαμερικανός
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Ισχύουν συμφωνίες με τρίτους
- Ναι
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)

.jpg)
.jpg)