HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

La lignée cellulaire HK Mad2-LAP/H2B-mCherry est un modèle cellulaire génétiquement modifié largement utilisé pour étudier la ségrégation des chromosomes et le point de contrôle de l'assemblage du fuseau pendant la mitose. Ces cellules sont dérivées des cellules HeLa Kyoto, une lignée cellulaire humaine robuste provenant à l'origine d'un carcinome cervical. L'aspect HK Mad2-LAP (LAP-tagged Mad2) de la lignée cellulaire facilite la visualisation et l'analyse fonctionnelle de la protéine Mad2, un composant critique du point de contrôle de l'assemblage du fuseau qui empêche le début de l'anaphase jusqu'à ce que tous les chromosomes soient correctement alignés à la plaque métaphasique.

L'incorporation de H2B-mCherry, où l'histone H2B est marquée avec la protéine fluorescente mCherry, permet l'imagerie en temps réel de la dynamique de la chromatine pendant la division cellulaire. Cette caractéristique fait de la lignée cellulaire HK Mad2-LAP/H2B-mCherry un excellent outil pour les techniques d'imagerie à haute résolution des cellules vivantes afin d'observer les mouvements chromosomiques et la progression mitotique dans les cellules humaines dans diverses conditions expérimentales. L'utilisation de marqueurs fluorescents permet un suivi et une quantification précis, ce qui fournit des informations précieuses sur les mécanismes moléculaires qui régissent la régulation du cycle cellulaire et la stabilité chromosomique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie