HK Mad2-LAP/H2B-mCherry

La línea celular HK Mad2-LAP/H2B-mCherry es un modelo celular de ingeniería genética ampliamente utilizado para estudiar la segregación cromosómica y el punto de control del ensamblaje del huso durante la mitosis. Estas células derivan de las células HeLa Kyoto, una robusta línea celular humana tomada originalmente de un carcinoma cervical. El aspecto HK Mad2-LAP (LAP-tagged Mad2) de la línea celular facilita la visualización y el análisis funcional de la proteína Mad2, un componente crítico del punto de control de ensamblaje del huso que impide el inicio de la anafase hasta que todos los cromosomas están correctamente alineados en la placa metafásica.

La incorporación de H2B-mCherry, donde la histona H2B está marcada con la proteína fluorescente mCherry, permite obtener imágenes en tiempo real de la dinámica de la cromatina durante la división celular. Esta característica convierte a la línea celular HK Mad2-LAP/H2B-mCherry en una herramienta excelente para las técnicas de obtención de imágenes de alta resolución de células vivas con el fin de observar los movimientos cromosómicos y la progresión mitótica en células humanas en diversas condiciones experimentales. El uso de etiquetas fluorescentes ayuda a realizar un seguimiento y una cuantificación precisos, proporcionando así información valiosa sobre los mecanismos moleculares que rigen la regulación del ciclo celular y la estabilidad cromosómica.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía