HK EGFP-άλφα-τουμπουλίνη/H2B-mCherry

Η κυτταρική σειρά HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto είναι ένα σχολαστικά κατασκευασμένο μοντέλο που έχει σχεδιαστεί για λεπτομερή απεικόνιση των κυτταρικών διεργασιών. Αυτή η κλωνική σειρά έχει διαμολυνθεί σταθερά για να εκφράζει δύο συγχωνεύσεις φθορίζουσας πρωτεΐνης που επιτρέπουν την απεικόνιση σε πραγματικό χρόνο τόσο της χρωματίνης όσο και του μικροσωληναριακού δικτύου. Η κόκκινη φθορίζουσα πρωτεΐνη mCherry είναι συγχωνευμένη με την κεντρική πρωτεΐνη ιστονών H2B, δημιουργώντας την H2B-mCherry. Αυτή η πρωτεΐνη σύντηξης εκφράζεται από το πλασμίδιο pH2B-mCherry-IRES-neo3 και χρησιμεύει ως δείκτης χρωματίνης, αναδεικνύοντας το πυρηνικό DNA στην απεικόνιση ζωντανών κυττάρων και διευκολύνοντας μελέτες σχετικά με τη δυναμική της χρωματίνης και την πυρηνική αρχιτεκτονική.

Επιπλέον, η εν λόγω κυτταρική σειρά εκφράζει μονομερή ενισχυμένη GFP (πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη) συγχωνευμένη με α-τουμπουλίνη, η οποία εισάγεται μέσω του πλασμιδίου pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b. Η σύντηξη της GFP-α-τουμπουλίνης παρέχει έντονο πράσινο φθορισμό που περιγράφει τις δομές των μικροσωληνίσκων στο εσωτερικό του κυττάρου. Αυτό το χαρακτηριστικό είναι ζωτικής σημασίας για τη μελέτη της οργάνωσης και της δυναμικής των μικροσωληνίσκων και του ρόλου τους στην κυτταρική διαίρεση και την ενδοκυτταρική μεταφορά. Η σταθερή ενσωμάτωση αυτών των κατασκευών επιτρέπει τη συνεχή, μακροχρόνια παρατήρηση αυτών των κυτταρικών συστατικών χωρίς την ανάγκη επαναλαμβανόμενης διαμόλυνσης, μειώνοντας έτσι τη μεταβλητότητα και ενισχύοντας την αξιοπιστία των πειραματικών αποτελεσμάτων. Η επιλογή ανθεκτικότητας στα φάρμακα μετά τη διαμόλυνση εξασφαλίζει τη σταθερότητα και την ομοιομορφία της έκφρασης μεταξύ των κυττάρων αυτής της σειράς.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης