HK EGFP-alfa-tubuliin/H2B-mCherry

HK EGFP-alfa-tubuliin/H2B-mCherry HeLa Kyoto rakuliin on hoolikalt loodud mudel, mis on loodud rakuprotsesside üksikasjalikuks visualiseerimiseks. See klooniline liin on stabiilselt transfekteeritud kahe fluorestseeruva valgu fusiooni ekspresseerimiseks, mis võimaldavad nii kromatiini kui ka mikrotubulaarvõrgustiku reaalajas pildistamist. Punane fluorestseeruv valk mCherry on fundeeritud histooni tuumvalguga H2B, luues H2B-mCherry. See fusioonvalk ekspresseeritakse pH2B-mCherry-IRES-neo3-plasmiidist ja see toimib kromatiini markerina, mis toob elusraku kujutamisel esile tuuma-DNA ja hõlbustab kromatiini dünaamika ja tuumaarhitektuuri uuringuid.

Lisaks ekspresseerib see rakuliin monomeerilist tugevdatud GFP-d (roheline fluorestseeruv valk), mis on fundeeritud α-tubuliiniga, mis on sisestatud pmEGFP-α-tubuliini-IRES-puro2b plasmiidi kaudu. GFP-α-tubuliini fusioon annab erksat rohelist fluorestsentsi, mis joonistab välja raku mikrotuubulite struktuurid. See omadus on oluline mikrotuubulite korralduse, dünaamika ja nende rolli uurimiseks raku jagunemisel ja rakusiseses transpordis. Nende konstruktsioonide stabiilne integreerimine võimaldab nende rakukomponentide pidevat ja pikaajalist jälgimist ilma korduva transfektsiooni vajaduseta, vähendades seeläbi varieeruvust ja suurendades katsetulemuste usaldusväärsust. Ravimiresistentsuse valimine pärast transfektsiooni tagab selle liini rakkude stabiilsuse ja ühtlase ekspressiooni.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest