HK EGFP-ألفا-توبولين/H2B-mCherry

إن خط خلايا هيلا كيوتو HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto هو نموذج مصمم هندسيًا بدقة مصمم لتصور العمليات الخلوية بشكل مفصل. وقد تم نقل هذا الخط النسلي بشكل ثابت للتعبير عن اندماج بروتينين فلوريين، مما يتيح التصوير في الوقت الحقيقي لكل من الكروماتين والشبكة الأنبوبية الدقيقة. يندمج بروتين mCherry الفلوري الأحمر مع بروتين الهيستون الأساسي H2B، مما يؤدي إلى تكوين H2B-mCherry. يتم التعبير عن هذا البروتين المدمج من بلازميد pH2B-mCherry-IRES-neo3 ويعمل كعلامة كروماتينية، مما يسلط الضوء على الحمض النووي في التصوير الخلوي الحي ويسهل الدراسات حول ديناميكيات الكروماتين والبنية النووية.

وبالإضافة إلى ذلك، يعبّر هذا الخط الخلوي عن بروتين GFP المحسّن أحادي اللون (بروتين الفلورسنت الأخضر) المدمج مع α-tubulin، الذي تم إدخاله عبر بلازميد pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b. يوفر الاندماج GFP-α-tubulin فلورة خضراء زاهية تحدد هياكل الأنابيب الدقيقة داخل الخلية. وتُعد هذه الميزة ضرورية لدراسة تنظيم الأنابيب الدقيقة وديناميكياتها ودورها في انقسام الخلية والنقل داخل الخلايا. ويسمح التكامل المستقر لهذه التركيبات بالمراقبة المستمرة وطويلة الأمد لهذه المكونات الخلوية دون الحاجة إلى نقل متكرر، مما يقلل من التباين ويعزز موثوقية النتائج التجريبية. يضمن اختيار مقاومة العقاقير بعد عملية النقل استقرار وتوحيد التعبير بين الخلايا في هذا الخط.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان