
- الأنسجة
- عنق الرحم
- المرض
- الورم السرطاني
- المرادفات
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b, HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
المستندات
HK EGFP-Kleisin-beta
Cell line · رقم المنتج 300674
The HK EGFP-Kleisin-beta cell line represents a genetically modified variant of Hela Kyoto cells designed primarily for the study of chromosome cohesion d...
التخصيص / التوصيات
- HK EGFP-Kleisin-betaCell line€800.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
يمثل خط خلايا HK EGFP-كلايسين-بيتا نوعاً معدلاً وراثياً من خلايا هيلا كيوتو المصممة أساساً لدراسة تماسك الكروموسومات خلال دورة الخلية. يعبر هذا الخط الخلوي عن بروتين فلوري أخضر محسن (EGFP) مدمج مع بروتين كلايسين-بيتا وهو مكون أساسي في مركب الكوشين الذي يعتبر حيوياً لتماسك الكروماتيد الشقيق. يسمح التعبير عن بروتين كلايسين بيتا المدمج مع بروتين EGFP بتصور ديناميكيات التماسك الكروموسوم وتوطينه في الوقت الحقيقي طوال دورة الخلية، مما يسهل التحليلات التفصيلية لبنية الكروموسوم ووظيفته في السياق الخلوي.
يُستخدم هذا النموذج الخلوي عادةً في الأبحاث التي تركز على آليات فصل الكروموسومات الانقسامية والميوزيوتية، وخاصةً في دراسة كيفية تأثير تنظيم الكوهيسين على الاستقرار الجيني وانقسام الخلية. يتيح الوسم الفلوري لكليزين-بيتا إمكانية فحص تفاعله مع مكونات التماسك الأخرى وبروتينات الكروموسومات مما يوفر نظرة ثاقبة للتجمع المكاني والزماني للتماسك على الكروموسومات. ويمتد استخدام هذا الخط الخلوي ليشمل دراسات الاضطرابات الوراثية والسرطانات التي تتعطل فيها وظيفة التماسكين، مما يوفر أداة قيمة لفهم التسبب في الأمراض وتطوير استراتيجيات علاجية.
- الأنسجة
- عنق الرحم
- المرض
- الورم السرطاني
- المرادفات
- HeLa Kyoto EGFP Kleisin-b
- HeLa Kyoto Kleisin-beta EGFP
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- أنثى
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-kleisin-beta construct for live-cell studies of cohesin and chromosome architecture. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- خلايا تشبه الخلايا الظهارية ذات الشكل الحجري الفسيفسائي
04المعرّفات
- المرجع
- HK EGFP-Kleisin-beta (كتالوج سيتيون رقم 300674)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_1D64
- المودع
- مختبر إلينبرغ (EMBL)
05التعبير والقابلية للإصابة
- التعبير البروتيني
- EGFP-كلايسين بيتا: الموقع / الجين: 1...589 / Pcmv، 619...645 / علامة العلم، 661...1368 / GFP، 1393...3206 / Kleisin Beta، 4474...5268 KanR / NeoR
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- كثافة البذر
- 1 × 104 خلية/سم2
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- 30 سنة
- الأصل العرقي
- أمريكي من أصل أفريقي
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- تسري اتفاقيات الأطراف الثالثة
- نعم
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)