HK EGFP-Kleisin-beta

La línea celular HK EGFP-Kleisin-beta es una variante genéticamente modificada de las células Hela Kyoto, diseñada principalmente para el estudio de la cohesión cromosómica durante el ciclo celular. Esta línea celular expresa una proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) fusionada con la proteína Kleisin-beta, un componente crucial del complejo de cohesina que es vital para la cohesión de las cromátidas hermanas. La expresión de la Kleisin-beta marcada con EGFP permite la visualización en tiempo real de la dinámica y la localización de la cohesina a lo largo del ciclo celular, lo que facilita análisis detallados de la estructura y función de los cromosomas en un contexto celular.

Este modelo celular se utiliza habitualmente en investigaciones centradas en los mecanismos de segregación cromosómica mitótica y meiótica, en particular para estudiar cómo la regulación de la cohesina influye en la estabilidad genética y la división celular. El marcaje fluorescente de la Kleisin-beta permite investigar su interacción con otros componentes de la cohesina y con proteínas cromosómicas, lo que brinda información sobre el ensamblaje espacial y temporal de la cohesina en los cromosomas. El uso de esta línea celular se extiende a estudios de trastornos genéticos y cánceres en los que la función de la cohesina se ve alterada, lo que ofrece una herramienta valiosa para comprender la patogénesis y desarrollar estrategias terapéuticas.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.