HK EGFP-Kleisin-beta

La lignée cellulaire HK EGFP-Kleisin-bêta est une variante génétiquement modifiée des cellules HeLa Kyoto, conçue principalement pour l’étude de la cohésion chromosomique au cours du cycle cellulaire. Cette lignée cellulaire exprime une protéine fluorescente verte améliorée (EGFP) fusionnée à la protéine Kleisin-bêta, un composant essentiel du complexe de la cohésine qui joue un rôle vital dans la cohésion des chromatides sœurs. L’expression de la protéine Kleisin-bêta marquée à l’EGFP permet la visualisation en temps réel de la dynamique et de la localisation de la cohésine tout au long du cycle cellulaire, facilitant ainsi l’analyse détaillée de la structure et de la fonction des chromosomes dans un contexte cellulaire.

Ce modèle cellulaire est généralement utilisé dans la recherche axée sur les mécanismes de la ségrégation chromosomique mitotique et méiotique, en particulier pour étudier comment la régulation de la cohésine influence la stabilité génétique et la division cellulaire. Le marquage fluorescent de la kleisine-bêta permet d’étudier son interaction avec d’autres composants de la cohésine et des protéines chromosomiques, fournissant ainsi des informations sur l’assemblage spatial et temporel de la cohésine sur les chromosomes. L’utilisation de cette lignée cellulaire s’étend aux études sur les troubles génétiques et les cancers dans lesquels la fonction de la cohésine est perturbée, offrant ainsi un outil précieux pour comprendre la pathogenèse et élaborer des stratégies thérapeutiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.