HK EGFP-alfa-tubulin/H2B-mCherry

Garis sel HK EGFP-alpha-tubulin/H2B-mCherry HeLa Kyoto adalah model yang direkayasa dengan cermat yang dirancang untuk visualisasi proses seluler secara terperinci. Garis klonal ini telah ditransfeksi secara stabil untuk mengekspresikan dua fusi protein fluoresen yang memungkinkan pencitraan waktu nyata dari kromatin dan jaringan mikrotubular. Protein fluoresen merah mCherry menyatu dengan protein histone inti H2B, menciptakan H2B-mCherry. Protein fusi ini diekspresikan dari plasmid pH2B-mCherry-IRES-neo3 dan berfungsi sebagai penanda kromatin, menyoroti DNA nuklir dalam pencitraan sel hidup dan memfasilitasi studi tentang dinamika kromatin dan arsitektur nuklir.

Selain itu, garis sel ini mengekspresikan GFP (Green Fluorescent Protein) yang disempurnakan secara monomer yang menyatu dengan α-tubulin, yang diperkenalkan melalui plasmid pmEGFP-α-tubulin-IRES-puro2b. Fusi GFP-α-tubulin memberikan fluoresensi hijau yang jelas yang menguraikan struktur mikrotubulus di dalam sel. Fitur ini sangat penting untuk mempelajari organisasi mikrotubulus, dinamika, dan perannya dalam pembelahan sel dan transportasi intraseluler. Integrasi yang stabil dari konstruksi ini memungkinkan pengamatan jangka panjang yang berkelanjutan terhadap komponen seluler ini tanpa perlu transfeksi berulang, sehingga mengurangi variabilitas dan meningkatkan keandalan hasil eksperimen. Seleksi resistensi obat setelah transfeksi memastikan stabilitas dan keseragaman ekspresi di antara sel-sel di jalur ini.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami