Langsung ke isi
HK EGFP-Cap-D2
Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma
Sinonim
HeLa Kyoto EGFP CAP-D2, HeLa Kyoto Cap-D2 EGFP

HK EGFP-Cap-D2

Cell line · Nomor produk 300675

The HK EGFP-Cap-D2 cell line is an engineered variant of Hela Kyoto cells, specifically designed for advanced research in cellular biology and genetic eng...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel HK EGFP-Cap-D2 adalah varian yang direkayasa dari sel Hela Kyoto, yang dirancang khusus untuk penelitian lanjutan dalam biologi seluler dan rekayasa genetika. Garis sel ini mengekspresikan protein fluoresen hijau yang disempurnakan (EGFP) yang menyatu dengan ujung-C reseptor dopamin D2, memungkinkan visualisasi dinamika dan distribusi reseptor secara real-time di bawah mikroskop fluoresensi. Fitur ini sangat bermanfaat untuk mempelajari perdagangan reseptor, jalur pensinyalan, dan efek agen farmakologis pada perilaku reseptor D2.

Sel-sel ini digunakan secara luas dalam penelitian neurologis untuk memahami lebih baik mekanisme yang mendasari pensinyalan dopamin, yang sangat penting dalam banyak gangguan neurologis seperti penyakit Parkinson, skizofrenia, dan depresi. Perpaduan EGFP ke reseptor D2 tidak mempengaruhi fungsi normal reseptor atau lokalisasi selulernya, menjadikan HK EGFP-Cap-D2 sebagai alat yang berharga untuk studi fisiologis dan patologis. Ekspresi EGFP yang stabil juga memungkinkan untuk studi longitudinal dalam sel hidup, memberikan wawasan tentang proses dinamis regulasi reseptor dan interaksi dengan komponen seluler lainnya.

Tisu
Serviks
Penyakit
Karsinoma
Sinonim
  • HeLa Kyoto EGFP CAP-D2
  • HeLa Kyoto Cap-D2 EGFP

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-Cap-D2 construct enabling live-cell studies of condensin-II dynamics. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Sel mirip epitel dengan bentuk batu mosaik

04Pengidentifikasi

Referensi
HK EGFP-Cap-D2 (nomor katalog Cytion 300675)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1D60
Nasabah penyimpanan
Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
EGFP-CAP-D2, Sekitar 80% sel menunjukkan ekspresi: Lokasi / Gen: 1..589 / Pcmv, 619..645 / Flag-tag, 646..660, 1375..1389 / nol, 661..1374 / EGFP, 1435..5638 / CAP-D2, 6886..7680 / KanR / NeoR
Produk
Promotor CMV, BENDERA oktapeptida, Penghubung glisin, Neomisin, Fosfotransferase

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
30 tahun
Etnis
Afrika-Amerika