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HK EGFP-알파-튜불린/H2B-mCherry
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HeLa Kyoto EGFP-a-tubulin/H2B-mCherry, HeLa H2B-mRFP and mEGFP-alpha-tubulin

HK EGFP-알파-튜불린/H2B-mCherry

Cell line · 제품 번호 300670

HK EGFP-알파-튜불린/H2B-mCherry HeLa Kyoto 세포주는 세포 과정을 상세하게 관찰할 수 있도록 정교하게 설계된 모델입니다. T...

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사용자 지정 / 추천 사항

재고 있음
롯
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1

01일반 정보

설명

HK EGFP-알파-튜불린/H2B-mCherry HeLa Kyoto 세포주는 세포 과정을 자세히 시각화할 수 있도록 세심하게 설계된 모델입니다. 이 클론 라인은 염색질과 미세소관 네트워크의 실시간 이미징을 가능하게 하는 두 개의 형광 단백질 융합을 발현하도록 안정적으로 형질 전환되었습니다. 빨간색 형광 단백질 mCherry는 핵심 히스톤 단백질 H2B에 융합되어 H2B-mCherry를 생성합니다. 이 융합 단백질은 pH2B-mCherry-IRES-neo3 플라스미드에서 발현되며 염색질 마커로 사용되어 살아있는 세포 이미징에서 핵 DNA를 강조하고 염색질 역학 및 핵 구조에 대한 연구를 용이하게 합니다.

또한 이 세포주는 α-튜불린에 융합된 단량체 강화 GFP(녹색 형광 단백질)를 발현하며, 이는 pmEGFP-α-튜불린-IRES-puro2b 플라스미드를 통해 도입되었습니다. GFP-α-튜불린 융합은 세포 내 미세소관 구조의 윤곽을 나타내는 선명한 녹색 형광을 제공합니다. 이 기능은 미세소관의 조직, 역학, 세포 분열 및 세포 내 수송에서의 역할을 연구하는 데 매우 중요합니다. 이러한 구조의 안정적인 통합을 통해 반복적인 감염 없이도 이러한 세포 구성 요소를 지속적이고 장기적으로 관찰할 수 있으므로 변동성을 줄이고 실험 결과의 신뢰성을 높일 수 있습니다. 감염 후 약물 내성 선택은 이 라인의 세포들 사이에서 발현의 안정성과 균일성을 보장합니다.

티슈
자궁경부
질병
암종
동의어
  • HeLa Kyoto EGFP-a-tubulin/H2B-mCherry
  • HeLa H2B-mRFP and mEGFP-alpha-tubulin

02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
유전자 변형 여부
GMO-S1
유전자 변형 생물(GMO) 여부 상세 정보
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains EGFP-α-tubulin and H2B-mCherry constructs for simultaneous imaging of microtubules and chromatin. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
생물안전 등급
1

03특징

형태학
모자이크 돌 모양의 상피 유사 세포
배가 시간
24시간

04식별자

인용
HK EGFP-알파-투불린/H2B-mCherry(사이티온 카탈로그 번호 300670)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_L802
예금자
엘렌버그 연구소(EMBL)

05발현 및 감수성

단백질 발현
EGFP-알파-튜불린, H2B-m체리: 위치/유전자: 1..589 / Pcmv, 652..1029 H2B, 1042..1752 / mCherry, 2983..3777 / KanR/NeoR
바이러스
HIV, HBV, HCV 음성.
제품
CMV 프로모터, 히스톤 H2B, 네오마이신, 포스포트랜스퍼라제

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
30년
민족
아프리카계 미국인