HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry rakuliin on geneetiliselt muundatud Hela Kyoto rakumudel, mis on välja töötatud, et hõlbustada tuumadünaamika ja kromatiini korralduse edasijõudnud uuringuid elusrakkudes. See rakuliin ekspresseerib kahte fusioonvalku: EGFP (tugevdatud roheline fluorestseeruv valk), mis on fusioonis Lamin A ja mCherry (punane fluorestseeruv valk), mis on fusioonis Histoon H2B-ga. EGFP-Lamin A-fusion toob esile tuumakesta ja võimaldab visualiseerida tuumaarhitektuuri muutusi rakutsükli edenemise ajal või erinevates katsetustingimustes. Samal ajal seondub H2B-mCherry fusioonvalk DNA-ga ja annab kromatiini tähistava elava punase fluorestsentsi, mis võimaldab kromosoomsete protsesside jälgimist reaalajas mitoosi ja interfaasi ajal.

Need rakud on hindamatu väärtusega reaalajas pildistamise rakendustes, sealhulgas tuuma terviklikkuse, DNA replikatsiooni ja rakkude vananemise uuringutes, samuti selliste haiguste uurimisel, kus tuumaarhitektuur on häiritud, nagu vähk ja laminoopiad. Selle rakuliini kahevärviline fluorestsents võimaldab samaaegselt visualiseerida nii tuumakesta kui ka kromatiini, hõlbustades tuuma ja tsütoplasma interaktsioonide ja kromatiini ruumilis-ajalise korralduse terviklikku mõistmist. Sellised võimalused muudavad selle kriitiliseks vahendiks molekulaarbioloogiliste uuringute ja rakulise biofüüsika jaoks, andes ülevaate geeniekspressiooni regulatsiooni, tuumaorganisatsiooni ja rakutsükli mehaanikast.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest