HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry šūnu līnija ir ģenētiski modificēts Hela Kyoto atvasināts šūnu modelis, kas izstrādāts, lai atvieglotu progresīvus kodola dinamikas un hromatīna organizācijas pētījumus dzīvās šūnās. Šī šūnu līnija ekspresē divus saplūšanas proteīnus: EGFP (uzlabots zaļais fluorescējošais proteīns), kas saplūdis ar lamīnu A, un mCherry (sarkanais fluorescējošais proteīns), kas saplūdis ar histonu H2B. EGFP un lamīna A sintēze izceļ kodola apvalku un ļauj vizualizēt kodola arhitektūras izmaiņas šūnu cikla attīstības laikā vai dažādos eksperimentālos apstākļos. Savukārt H2B-mCherry saplūšanas proteīns saistās ar DNS un nodrošina spilgtu sarkanu fluorescenci, kas iezīmē hromatīnu, ļaujot reāllaikā novērot hromosomu procesus mitozes un interfāzes laikā.

Šīs šūnas ir nenovērtējamas reāllaika attēlveidošanas lietojumiem, tostarp pētījumiem par kodola integritāti, DNS replikāciju un šūnu novecošanos, kā arī pētījumiem par slimībām, kurās ir traucēta kodola arhitektūra, piemēram, vēzi un laminopātijas. Šīs šūnu līnijas divkrāsu fluorescences funkcija ļauj vienlaicīgi vizualizēt gan kodola apvalku, gan hromatīnu, veicinot visaptverošu izpratni par kodola un citoplazmas mijiedarbību un hromatīna telpiski temporālo organizāciju. Šādas iespējas padara to par ļoti svarīgu rīku molekulārās bioloģijas pētījumos un šūnu biofizikā, sniedzot ieskatu gēnu ekspresijas regulēšanas mehānismā, kodola organizācijā un šūnu ciklā.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu