HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

Linia komórkowa HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry jest genetycznie zmodyfikowanym modelem komórkowym pochodzącym z Hela Kyoto, opracowanym w celu ułatwienia zaawansowanych badań nad dynamiką jądrową i organizacją chromatyny w żywych komórkach. Ta linia komórkowa wyraża dwa białka fuzyjne: EGFP (wzmocnione zielone białko fluorescencyjne) połączone z laminą A i mCherry (czerwone białko fluorescencyjne) połączone z histonem H2B. Fuzja EGFP z laminą A podkreśla otoczkę jądrową i pozwala na wizualizację zmian architektury jądrowej podczas progresji cyklu komórkowego lub w różnych warunkach eksperymentalnych. Tymczasem białko fuzyjne H2B-mCherry wiąże się z DNA i zapewnia żywą czerwoną fluorescencję, która oznacza chromatynę, umożliwiając obserwację w czasie rzeczywistym procesów chromosomalnych podczas mitozy i interfazy.

Komórki te są nieocenione w zastosowaniach obrazowania w czasie rzeczywistym, w tym w badaniach nad integralnością jądrową, replikacją DNA i starzeniem się komórek, a także w badaniach nad chorobami, w których architektura jądrowa jest zaburzona, takimi jak rak i laminopatie. Dwukolorowa fluorescencja tej linii komórkowej pozwala na jednoczesną wizualizację zarówno otoczki jądrowej, jak i chromatyny, ułatwiając kompleksowe zrozumienie interakcji jądrowo-cytoplazmatycznych i przestrzenno-czasowej organizacji chromatyny. Takie możliwości sprawiają, że jest to krytyczne narzędzie do badań biologii molekularnej i biofizyki komórkowej, zapewniające wgląd w mechanikę regulacji ekspresji genów, organizację jądrową i cykl komórkowy.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym