.jpg)
- Tissue
- ปากมดลูก
- Disease
- มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
- Synonyms
- HeLa Kyoto EGFP-LaminA and H2B-mCherry
Documents
HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry
Cell line · Product number 300921
The HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry cell line is a genetically engineered Hela Kyoto derived cell model developed to facilitate advanced studies in nuclear dyn...
Customization / Recommendations
- HK EGFP-LaminA/H2B-mCherryCell line€800.00
01General information
- Description
สายเซลล์ HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry เป็นสายเซลล์ที่พัฒนาขึ้นโดยใช้เทคโนโลยีพันธุวิศวกรรมจากเซลล์ Hela Kyoto เพื่ออำนวยความสะดวกในการศึกษาขั้นสูงเกี่ยวกับพลวัตของนิวเคลียสและการจัดระเบียบโครมาตินภายในเซลล์ที่มีชีวิต สายเซลล์นี้แสดงโปรตีนฟิวชันสองชนิด ได้แก่ EGFP (โปรตีนเรืองแสงสีเขียวที่พัฒนาขึ้น) ที่เชื่อมต่อกับ Lamin A และ mCherry (โปรตีนเรืองแสงสีแดง) ที่เชื่อมต่อกับ Histone H2Bการรวมตัวของ EGFP-Lamin A ช่วยเน้นให้เห็นถึงเปลือกนิวเคลียสและช่วยให้สามารถมองเห็นการเปลี่ยนแปลงของโครงสร้างนิวเคลียสในระหว่างกระบวนการของวงจรเซลล์หรือภายใต้เงื่อนไขการทดลองต่างๆ ได้ ในขณะเดียวกัน โปรตีนที่รวมตัวของ H2B-mCherry จะจับกับ DNA และให้แสงฟลูออเรสเซนต์สีแดงสดใสซึ่งทำเครื่องหมายโครมาติน ทำให้สามารถสังเกตกระบวนการของโครโมโซมได้แบบเรียลไทม์ในระหว่างกระบวนการไมโทซิสและอินเตอร์เฟส
เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการประยุกต์ใช้ในภาพแบบเรียลไทม์ รวมถึงการศึกษาเกี่ยวกับความสมบูรณ์ของนิวเคลียส การจำลองดีเอ็นเอ และการแก่ของเซลล์ ตลอดจนการวิจัยเกี่ยวกับโรคที่มีการเสื่อมของโครงสร้างนิวเคลียส เช่น มะเร็ง และโรคที่เกี่ยวข้องกับลามินินคุณสมบัติการเรืองแสงสองสีของเซลล์ไลน์นี้ช่วยให้สามารถมองเห็นเยื่อหุ้มนิวเคลียสและโครมาตินได้พร้อมกัน ส่งเสริมความเข้าใจอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ระหว่างนิวเคลียสกับไซโทพลาซึม และการจัดระเบียบเชิงพื้นที่และเชิงเวลาของโครมาติน ความสามารถดังกล่าวทำให้เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการวิจัยทางชีววิทยาระดับโมเลกุลและชีวฟิสิกส์ของเซลล์ โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกการควบคุมการแสดงออกของยีน การจัดระเบียบของนิวเคลียส และวัฏจักรของเซลล์
- Tissue
- ปากมดลูก
- Disease
- มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
- Synonyms
- HeLa Kyoto EGFP-LaminA and H2B-mCherry
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains EGFP-Lamin A and H2B-mCherry constructs enabling dual-color imaging of nuclear lamina and chromatin. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- เซลล์คล้ายเยื่อบุผิวที่มีรูปร่างเป็นหินแบบโมเสก
04Identifiers
- Citation
- HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300921)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1D62
- Depositor
- ห้องปฏิบัติการเอลเลนเบิร์ก (EMBL)
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- EGFP-LaminA/H2B-mCherry
- Products
- ฮิสโตน H2B
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 30 ปี
- Ethnicity
- แอฟริกันอเมริกัน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Third-party agreements apply
- Yes
.jpg)
.jpg)
.jpg)
.jpg)

.jpg)
.jpg)