HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry

De HK EGFP-LaminA/H2B-mCherry cellijn is een genetisch gemanipuleerd Hela Kyoto afgeleid celmodel ontwikkeld om geavanceerde studies in nucleaire dynamica en chromatine organisatie in levende cellen te vergemakkelijken. Deze cellijn brengt twee fusie-eiwitten tot expressie: EGFP (versterkt groen fluorescerend eiwit) samengevoegd met Lamin A, en mCherry (een rood fluorescerend eiwit) samengevoegd met Histon H2B. De EGFP-Lamine A fusie benadrukt de nucleaire envelop en maakt de visualisatie mogelijk van veranderingen in de nucleaire architectuur tijdens de voortgang van de celcyclus of onder verschillende experimentele omstandigheden. Ondertussen bindt het H2B-mCherry fusie-eiwit aan DNA en zorgt voor een levendige rode fluorescentie die chromatine markeert, waardoor real-time observatie van chromosomale processen tijdens mitose en interfase mogelijk is.

Deze cellen zijn van onschatbare waarde voor real-time beeldvormingstoepassingen, waaronder studies naar nucleaire integriteit, DNA-replicatie en celveroudering, evenals onderzoek naar ziekten waarbij de nucleaire architectuur verstoord is, zoals kanker en laminopathieën. De tweekleurige fluorescentie-eigenschap van deze cellijn maakt gelijktijdige visualisatie van zowel de nucleaire envelop als het chromatine mogelijk, waardoor een uitgebreid begrip van kern-cytoplasmatische interacties en de spatiotemporele organisatie van chromatine mogelijk wordt. Door deze mogelijkheden is het een cruciaal hulpmiddel voor moleculair biologisch onderzoek en cellulaire biofysica, dat inzicht geeft in de mechanismen van genexpressieregulatie, nucleaire organisatie en de celcyclus.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring