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HK EGFP-H2B
ティッシュ
子宮頸部
病気
癌腫
同義語
HeLa Kyoto H2B-EGFP, HeLa Kyoto H2B EGFP, HeLa-H2B-GFP

HK EGFP-H2B

Cell line · 製品番号 300673

The HK EGFP-H2B cell line is a genetically modified Hela Kyoto cell line used primarily for the study of chromatin dynamics and nuclear processes. This ce...

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01概要

説明

HK EGFP-H2B細胞株は、主にクロマチンダイナミクスと核プロセスの研究に使用される遺伝子組み換えHela京都細胞株である。この細胞株は、増強緑色蛍光タンパク質(EGFP)とヒストンH2Bからなる融合タンパク質を発現している。EGFPをH2Bタンパク質に組み込むことで、蛍光顕微鏡下で生きた細胞内のクロマチンをリアルタイムで可視化することができ、核の空間的・時間的組織化に関する貴重な知見が得られる。

EGFP-H2B融合体は、細胞周期の進行、有糸分裂、遺伝子発現制御の研究など、細胞生物学における多くの応用を促進する。蛍光パターンを観察することにより、研究者は細胞周期のフェーズ、染色体分離、核内の構造変化を同定し、解析することができる。この細胞株はヒト成体細胞由来であるため、ヒト生物学との関連性が保証されており、基礎生物学的研究と、より応用的な薬学的研究の両方で利用されている。

さらに、HK EGFP-H2B細胞株はエピジェネティクス研究において重要なツールとなっている。ヒストンの挙動を直接観察する能力は、遺伝子の発現やサイレンシングの根底にあるエピジェネティックなメカニズムや、様々なエピジェネティック修飾因子の効果を理解するのに役立つ。この細胞株は、ライブセルイメージング実験に強固に応用できるため、動的な細胞解析を必要とする詳細な研究には不可欠である。

ティッシュ
子宮頸部
病気
癌腫
同義語
  • HeLa Kyoto H2B-EGFP
  • HeLa Kyoto H2B EGFP
  • HeLa-H2B-GFP

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains an EGFP-H2B construct allowing real-time visualization of chromatin organization. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
モザイク状の石の形をした上皮様細胞

04識別子

引用
HK EGFP-H2B(Cytion カタログ番号 300673)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_1D63
預金者
エレンバーグ・ラボ(EMBL)

05発現と感受性

タンパク質の発現
EGFP-H2B:位置/遺伝子:1...589/Pcmv、613...1329/EGFP、1387...1764/H2B、3001...3795/KanR/NeoR
製品
CMVプロモーター, ヒストンH2B, ネオマイシン, リン酸化酵素

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
30年
民族
アフリカ系アメリカ人