Siirry sisältöön
CLS-CD-3575
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Syöpä
Synonyymit
CLS-CD3575

Asiakirjat

CLS-CD-3575

Cell line · Tuotenumero 400146

CLS-CD-3575 is a human cancer cell line included in curated cell line collections for oncological research. It is derived from a solid tumor of epithelial...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CLS-CD-3575 on ihmisen syöpäsolulinja, joka sisältyy onkologisen tutkimuksen kuratoituihin solulinjakokoelmiin. Se on peräisin aikuispotilaalta otetusta epiteelisestä kiinteästä kasvaimesta ja on sopeutettu jatkuvaan in vitro -viljelyyn. Solut kasvavat tarttuvasti tavanomaisissa viljelyolosuhteissa ja niiden morfologia vastaa niiden alkuperäistä kudosta, muodostaen epiteelin kaltaisia ominaisuuksia omaavia yksikerroksisia rakenteita. Kuten monet vakiintuneet karsinoomasolulinjat, CLS-CD-3575 osoittaa vakaata proliferaatiota ja sopivuutta rutiinipassageille.

Molekyylitasolla CLS-CD-3575:llä on pahanlaatuisille epiteelituumoreille tyypillisiä genomimuutoksia, kuten kromosomien epätasapainoa ja proliferaatioon ja selviytymiseen liittyviä säätelyhäiriöitä. Riippuen tuumorin alkuperästä, voidaan havaita linjaan liittyvien sytokeratien ja tuumoriin liittyvien merkkiaineiden ilmentymistä. Nämä ominaisuudet tekevät linjasta sopivan in vitro -tutkimuksiin, jotka koskevat onkogeenistä signalointia, solusyklin säätelyä, apoptoosia ja lääkevasteen profilointia.

CLS-CD-3575:tä käytetään kokeellisissa ympäristöissä, kuten sytotoksisuustestauksessa, molekyylireittianalyysissä ja kohdennettujen hoitostrategioiden arvioinnissa. Sen toistettavat kasvun ominaisuudet ja yhteensopivuus tavanomaisten biokemiallisten, molekyylibiologisten ja kuvantamistekniikoiden kanssa tekevät siitä käytännöllisen mallin mekanistiseen syöpätutkimukseen ja prekliiniseen yhdisteiden seulontaan.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Syöpä
Synonyymit
  • CLS-CD3575

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, syngeenisissä hiirissä

04Tunnisteet

Lähdeviite
CLS-CD-3575 (Cytionin luettelonumero 400146)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5730

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–3 x 104 /cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Määrittelemätön