Prejsť na obsah
CLS-CD-3575
Tkanivo
Obličky
Choroba
Karcinóm
Synonymá
CLS-CD3575

Dokumenty

CLS-CD-3575

Cell line · Číslo výrobku 400146

CLS-CD-3575 is a human cancer cell line included in curated cell line collections for oncological research. It is derived from a solid tumor of epithelial...

€800.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

CLS-CD-3575 je ľudská rakovinová bunka zaradená do kurátorských zbierok buniek pre onkologický výskum. Pochádza z pevného nádoru epitelového pôvodu získaného od dospelého pacienta a bola prispôsobená na kontinuálnu in vitro kultiváciu. Bunky rastú adhezívne za štandardných kultivačných podmienok a vykazujú morfológiu zodpovedajúcu ich pôvodnému tkanivu, pričom tvoria monovrstvy s epiteliálnymi charakteristikami. Podobne ako mnohé etablované karcinómové bunky, CLS-CD-3575 vykazuje stabilnú proliferáciu a vhodnosť pre rutinné pasážovanie.

Z molekulárneho hľadiska vykazuje CLS-CD-3575 genomické zmeny typické pre malígne epiteliálne nádory, vrátane chromozómových nerovnováh a deregulovaných signálnych dráh spojených s proliferáciou a prežitím. V závislosti od konkrétneho pôvodu nádoru je možné detekovať expresiu cytokeratínov spojených s líniou a markerov súvisiacich s nádorom. Vďaka týmto vlastnostiam je táto línia vhodná na štúdium onkogénnej signalizácie, regulácie bunkového cyklu, apoptózy a profilovania reakcie na lieky in vitro.

CLS-CD-3575 sa používa v experimentálnych podmienkach, vrátane testovania cytotoxicity, analýzy molekulárnych dráh a hodnotenia cielených terapeutických stratégií. Jeho reprodukovateľné rastové charakteristiky a kompatibilita so štandardnými biochemickými, molekulárno-biologickými a zobrazovacími technikami z neho robia praktický model pre mechanistický výskum rakoviny a predklinické skríningové testovanie zlúčenín.

Tkanivo
Obličky
Choroba
Karcinóm
Synonymá
  • CLS-CD3575

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Tumorigenický
Áno, u syngenetických myší

04Identifikátory

Citácia
CLS-CD-3575 (katalógové číslo Cytion 400146)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5730

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 3 x 104 /cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
Nešpecifikované