Pāriet uz saturu
CLS-CD-3575
Audums
Nieres
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
CLS-CD3575

Dokumenti

CLS-CD-3575

Cell line · Preces numurs 400146

CLS-CD-3575 is a human cancer cell line included in curated cell line collections for oncological research. It is derived from a solid tumor of epithelial...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CLS-CD-3575 ir cilvēka vēža šūnu līnija, kas iekļauta onkoloģisko pētījumu vajadzībām izveidotajā šūnu līniju kolekcijā. Tā ir iegūta no pieaugušam pacientam izņemta epitēlija izcelsmes cietā audzēja un pielāgota nepārtrauktai in vitro kultivēšanai. Šūnas aug piekļāvušās standarta kultivēšanas apstākļos un uzrāda morfoloģiju, kas atbilst to izcelsmes audiem, veidojot monoslāņus ar epitēlija tipa īpašībām. Tāpat kā daudzas citas izveidotas karcinomas šūnu līnijas, CLS-CD-3575 uzrāda stabilu proliferāciju un piemērotību rutīniskai pasāžai.

Molekulāri CLS-CD-3575 uzrāda genomiskas izmaiņas, kas raksturīgas ļaundabīgiem epitēlija audzējiem, tostarp hromosomu nelīdzsvarotību un deregulētus signālceļus, kas saistīti ar proliferāciju un izdzīvošanu. Atkarībā no konkrētā audzēja izcelsmes var tikt konstatēta ar ciltsrakstu saistītu citokeratīnu un ar audzēju saistītu marķieru ekspresija. Šādas īpašības padara šo līniju piemērotu onkogēnās signālizācijas, šūnu cikla regulācijas, apoptozes un zāļu reakcijas profilēšanas pētījumiem in vitro.

CLS-CD-3575 tiek izmantots eksperimentālās vidēs, tostarp citotoksicitātes testēšanā, molekulāro ceļu analīzē un mērķtiecīgu terapeitisko stratēģiju novērtēšanā. Tā reproducējamās augšanas īpašības un saderība ar standarta bioķīmiskajām, molekulārbioloģiskajām un attēlveidošanas metodēm padara to par praktisku modeli mehānisma vēža pētījumiem un pirmsklīniskai savienojumu skrīningam.

Audums
Nieres
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
  • CLS-CD3575

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Jā, singēniskām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
CLS-CD-3575 (Cytion kataloga numurs 400146)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5730

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 līdz 3 x 104 /cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts