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CLS-CD-3575
Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma
Sinonimi
CLS-CD3575

Documenti

CLS-CD-3575

Cell line · Codice prodotto 400146

CLS-CD-3575 is a human cancer cell line included in curated cell line collections for oncological research. It is derived from a solid tumor of epithelial...

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01Informazioni generali

Descrizione

CLS-CD-3575 è una linea cellulare tumorale umana inclusa nelle collezioni di linee cellulari selezionate per la ricerca oncologica. Deriva da un tumore solido di origine epiteliale ottenuto da un paziente adulto ed è stata adattata alla coltura in vitro continua. Le cellule crescono in modo aderente in condizioni di coltura standard e presentano una morfologia coerente con il loro tessuto di origine, formando monostrati con caratteristiche simili a quelle epiteliali. Come molte linee cellulari carcinomatose consolidate, CLS-CD-3575 dimostra una proliferazione stabile e l'idoneità al passaggio di routine.

A livello molecolare, CLS-CD-3575 mostra alterazioni genomiche tipiche dei tumori epiteliali maligni, tra cui squilibri cromosomici e vie di segnalazione deregolate associate alla proliferazione e alla sopravvivenza. A seconda dell'origine specifica del tumore, è possibile rilevare l'espressione di citocheratine associate al lignaggio e di marcatori correlati al tumore. Tali caratteristiche rendono la linea adatta per studi di segnalazione oncogenica, regolazione del ciclo cellulare, apoptosi e profilazione della risposta ai farmaci in vitro.

CLS-CD-3575 è utilizzato in contesti sperimentali che includono test di citotossicità, analisi dei percorsi molecolari e valutazione di strategie terapeutiche mirate. Le sue caratteristiche di crescita riproducibili e la compatibilità con le tecniche standard di biochimica, biologia molecolare e imaging lo rendono un modello pratico per la ricerca meccanicistica sul cancro e lo screening preclinico dei composti.

Tessuto
Rene
Malattia
Carcinoma
Sinonimi
  • CLS-CD3575

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Non specificato
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tumorigenico
Sì, in topi singenici

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CLS-CD-3575 (numero di catalogo Cytion 400146)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5730

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 2 a 3 x 104 /cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Non specificato