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CLS-CD-3575
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
CLS-CD3575

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CLS-CD-3575

Cell line · Número do produto 400146

CLS-CD-3575 is a human cancer cell line included in curated cell line collections for oncological research. It is derived from a solid tumor of epithelial...

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01Informações gerais

Descrição

CLS-CD-3575 é uma linha celular cancerígena humana incluída em coleções de linhas celulares selecionadas para investigação oncológica. É derivada de um tumor sólido de origem epitelial obtido de um paciente adulto e foi adaptada para cultura in vitro contínua. As células crescem de forma aderente em condições de cultura padrão e apresentam morfologia consistente com o seu tecido de origem, formando monocamadas com características epiteliais. Tal como muitas linhas celulares de carcinoma estabelecidas, a CLS-CD-3575 demonstra proliferação estável e adequação para passagens de rotina.

Molecularmente, a CLS-CD-3575 apresenta alterações genómicas típicas de tumores epiteliais malignos, incluindo desequilíbrios cromossómicos e vias de sinalização desreguladas associadas à proliferação e sobrevivência. Dependendo da origem específica do tumor, pode ser detetada a expressão de citoqueratinas associadas à linhagem e marcadores relacionados com o tumor. Tais características tornam a linha adequada para estudos de sinalização oncogénica, regulação do ciclo celular, apoptose e perfil de resposta a medicamentos in vitro.

O CLS-CD-3575 é utilizado em contextos experimentais, incluindo testes de citotoxicidade, análise de vias moleculares e avaliação de estratégias terapêuticas direcionadas. As suas características de crescimento reprodutíveis e compatibilidade com técnicas padrão de bioquímica, biologia molecular e imagiologia tornam-no um modelo prático para a investigação mecanicista do cancro e triagem pré-clínica de compostos.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
  • CLS-CD3575

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tumorigénico
Sim, em ratinhos singénicos

04Identificadores

Referência
CLS-CD-3575 (número de catálogo Cytion 400146)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5730

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 a 3 x 104 /cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Não especificado