NCI-H1793

NCI-H1793 on ihmisen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä (NSCLC) -solulinja, joka on peräisin aikuiselta potilaalta, jolla on keuhkojen adenokarsinooma. Solut ovat epiteelimorfologisia ja kasvavat tarttuvasti tavanomaisissa kudosviljelyolosuhteissa. Keuhkoadenokarsinooman edustavana mallina NCI-H1793 säilyttää tämän histologisen alatyypin keskeiset molekyyli- ja fenotyyppiset ominaisuudet, minkä vuoksi se soveltuu keuhkosyövän biologian, kasvaimen etenemisen ja hoitovasteen in vitro -tutkimuksiin.

NCI-H1793:n molekyylikarakterisoinnissa on tunnistettu aktivoiva mutaatio KRAS-onkogeenissä (G12C), joka on yleinen ajuri-muutos keuhkojen adenokarsinoomassa. Tämä mutaatio johtaa alavirran signalointireittien, kuten MAPK- ja PI3K-AKT-kaskadien, konstitutiiviseen aktivoitumiseen, mikä edistää proliferaatiota ja selviytymistä. KRAS G12C:n läsnäolo tekee NCI-H1793:sta erityisen arvokkaan RAS-vetoisen onkogeenisen signalointireitin tutkimisessa ja mutanttia KRAS:ia tai sen alavirran efektorimolekyylejä vastaan suunnattujen kohdennettujen inhibiittorien arvioinnissa. Solulinjan on myös raportoitu sisältävän muita NSCLC:lle tyypillisiä genomin muutoksia, mikä tukee sen merkitystä molekyylitasolla määritellyn keuhkosyövän prekliinisenä mallina.

Määritellyn onkogeenisen taustansa ja epiteelisen tuumorifenotyyppinsä ansiosta NCI-H1793:a käytetään laajalti tutkimuksissa, joissa arvioidaan kohdennettuja hoitoja, resistenssimekanismeja ja yhdistelmähoitostrategioita KRAS-mutantissa keuhkosyövässä. Se toimii vankkana alustana funktionaaliselle genomiikalle, lääkeaineiden seulonnalle ja reittianalyysille, joiden tarkoituksena on selvittää RAS-vetoisten pahanlaatuisten kasvainten haavoittuvuuksia.

HITES-kasvatusaine, täydennetty

Tämän solulinjan perusviljelyalusta on DF12. Täydellisen kasvualustan valmistamiseksi lisää perusviljelyalustaan seuraavat komponentit:

• 0,005 mg/ml insuliinia
• 0,01 mg/ml transferriini
• 30 nM natriumseleniitti (lopullinen pitoisuus)
• 10 nM hydrokortisoni (lopullinen pitoisuus)
• 10 nM beeta-estradioli (lopullinen pitoisuus)
• Lisäksi 2 mM L-glutamiinia (lopullinen pitoisuus 4,5 mM)
• 5 % sikiön naudan seerumia (lopullinen pitoisuus)

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa