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Maladie
Lymphome de l'intestin de poulet
Synonymes
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Documents

DT40

Cell line · Référence du produit 305249

€0.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire DT40 est dérivée du poulet (Gallus gallus) et est principalement utilisée comme modèle pour étudier la biologie des cellules B et l'immunologie. Issues d'un lymphome bursal induit par le virus de la leucose aviaire, les cellules DT40 sont uniques en raison de leur taux élevé de recombinaison homologue, ce qui les rend particulièrement utiles pour les études de ciblage génétique. Cette caractéristique permet des modifications génétiques efficaces et précises, facilitant la recherche dans divers domaines, notamment la réparation de l'ADN, la dynamique chromosomique et la fonction des gènes. Les cellules DT40 présentent une croissance rapide et un caryotype stable, qui sont des caractéristiques avantageuses pour la reproductibilité et la cohérence des expériences. Elles sont largement utilisées pour étudier les mécanismes de conversion et de diversification des gènes des immunoglobulines, contribuant ainsi de manière significative à notre compréhension du système immunitaire adaptatif. En outre, les cellules DT40 sont employées dans la recherche pharmacologique pour cribler des composés thérapeutiques potentiels et pour analyser les réponses cellulaires aux dommages causés à l'ADN. Outre leurs applications en immunologie et en recherche génétique, les cellules DT40 jouent également un rôle essentiel dans l'étude des voies de signalisation cellulaires. Elles constituent un système robuste pour disséquer les rôles de diverses protéines et gènes dans la transduction des signaux, l'apoptose et la régulation du cycle cellulaire. La facilité de manipulation génétique des cellules DT40, combinée à leur pertinence biologique, continue d'en faire un outil crucial pour la recherche biomédicale. Toutefois, il est essentiel de noter que les résultats obtenus sur les cellules DT40 doivent être validés dans des systèmes mammifères en raison des différences spécifiques à chaque espèce.

Maladie
Lymphome de l'intestin de poulet
Synonymes
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Classification

Organisme
Poulet
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type lymphoblaste
Type de cellule
Cellule B
Tumorigène
Oui, chez les poulets syngéniques

04Identifiants

Référence
DT40 (numéro de catalogue Cytion 305249)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Immunoglobuline M
Expression des protéines
Immunoglobuline M
Oncogènes
C-MYC
Virus
Transformant : Virus de la leucose aviaire (ALV)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 0,05 mM de 2-mercaptoéthanol, 5 % de sérum de poulet et 10 % de bouillon de tryptose-phosphate → Le 2-mercaptoéthanol ne reste stable dans le milieu que pendant 2 à 3 jours et 24 heures à 37 °C ; le protéger de la lumière
Réactif de dissociation
Aucun
Repiquage
Cellules en suspension : Retirer les cellules du substrat en les pipettant avec du milieu frais. Pour obtenir des cellules individuelles, passer la suspension plusieurs fois à travers une aiguille de calibre 22 et distribuer dans de nouveaux flacons.
Densité de semis
2 à 4 × 10⁵ cellules/ml
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
Hy-Line SC
Âge du donneur
1 jour