Ga naar de inhoud
Ziekte
Lymfoom van de slijmbeurs
Synoniemen
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Documenten

DT40

Cell line · Productnummer 305249

€0.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De DT40-cellijn is afkomstig van kippen (Gallus gallus) en wordt voornamelijk gebruikt als model voor het bestuderen van B-celbiologie en immunologie. DT40 cellen zijn afkomstig van een door aviair leukosevirus geïnduceerd slijmbeurslymfoom en zijn uniek vanwege hun hoge homologe recombinatiesnelheid, waardoor ze bijzonder waardevol zijn voor gen targeting studies. Deze eigenschap maakt efficiënte en precieze genetische modificaties mogelijk, wat onderzoek op verschillende gebieden vergemakkelijkt, waaronder DNA-herstel, chromosomale dynamiek en genfunctie. DT40 cellen vertonen een snelle groei en een stabiel karyotype, wat gunstige eigenschappen zijn voor experimentele reproduceerbaarheid en consistentie. Ze worden uitgebreid gebruikt om de mechanismen van omzetting en diversificatie van immunoglobulinegenen te bestuderen, wat aanzienlijk bijdraagt aan ons begrip van het adaptieve immuunsysteem. Bovendien worden DT40-cellen gebruikt in farmacologisch onderzoek om te screenen op potentiële therapeutische verbindingen en om cellulaire reacties op DNA-schade te analyseren. Naast hun toepassingen in immunologie en genetisch onderzoek, zijn DT40-cellen ook instrumenteel bij het onderzoeken van cellulaire signaalwegen. Ze bieden een robuust systeem voor het ontleden van de rol van verschillende eiwitten en genen in signaaltransductie, apoptose en celcyclusregulatie. Het gemak van genetische manipulatie in DT40 cellen, gecombineerd met hun biologische relevantie, maakt ze nog steeds tot een cruciaal instrument in biomedisch onderzoek. Het is echter essentieel op te merken dat bevindingen in DT40 cellen gevalideerd moeten worden in zoogdiersystemen vanwege soortspecifieke verschillen.

Ziekte
Lymfoom van de slijmbeurs
Synoniemen
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Classificatie

Organisme
Kip
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast-achtig
Celtype
B cel
Tumorverwekkend
Ja, in syngene kippen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
DT40 (Cytion catalogusnummer 305249)
NCBI-belastingnummer
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Immunoglobuline M
Eiwit-expressie
Immunoglobuline M
Oncogenen
C-MYC
Virussen
Transformant: Aviair leukosevirus (ALV)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS, 0,05 mM 2-mercaptoethanol, 5% kippenserum en 10% tryptosefosfaatbouillon toe → 2-mercaptoethanol blijft slechts 2-3 dagen stabiel in het medium en 24 uur bij 37 °C – tegen licht beschermen
Dissociatiereagens
Geen
Heruitplanten
Suspensiecellen: Verwijder cellen van het substraat door pipetteren met vers medium. Om losse cellen te verkrijgen, passeer de suspensie meerdere keren door een naald van 22 gauge en breng over in nieuwe kolven.
Zaaidichtheid
2 tot 4 × 10⁵ cellen/ml
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Hy-Line SC
Leeftijd van de donor
1 dag