Mine otse sisu juurde
Haigus
Kana bursaalne lümfoom
Sünonüümid
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Dokumendid

DT40

Cell line · Toote number 305249

€0.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DT40 rakuliin on saadud kanalt (Gallus gallus) ja seda kasutatakse peamiselt B-rakkude bioloogia ja immunoloogia uurimise mudelina. Linnuleukoosi viiruse poolt põhjustatud bursaalse lümfoomi päritolu DT40 rakud on unikaalsed oma kõrge homoloogse rekombinatsiooni määra tõttu, mis muudab need eriti väärtuslikuks geenide sihtmärgistamise uuringutes. See omadus võimaldab teha tõhusaid ja täpseid geneetilisi muudatusi, hõlbustades uurimistööd mitmesugustes valdkondades, sealhulgas DNA parandamisel, kromosoomide dünaamikas ja geenide funktsioonis. DT40-rakkudel on kiire kasv ja stabiilne kariotüüp, mis on eelised eksperimentide korratavuse ja järjepidevuse seisukohalt. Neid kasutatakse laialdaselt immunoglobuliini geenikonversiooni ja diversifitseerumise mehhanismide uurimiseks, aidates oluliselt kaasa adaptiivse immuunsüsteemi mõistmisele. Lisaks kasutatakse DT40-rakke farmakoloogilistes uuringutes potentsiaalsete ravimühendite sõelumiseks ja rakkude reaktsioonide analüüsimiseks DNA-kahjustuste korral. Lisaks rakendustele immunoloogias ja geneetilistes uuringutes on DT40-rakud olulised ka rakuliste signaaliteede uurimisel. Need pakuvad usaldusväärset süsteemi erinevate valkude ja geenide rollide analüüsimiseks signaaliülekandes, apoptoosis ja rakutsükli reguleerimises. DT40-rakkude lihtne geneetiline manipuleeritavus koos nende bioloogilise asjakohasusega teeb neist jätkuvalt olulise vahendi biomeditsiinilistes uuringutes. Siiski on oluline märkida, et liigispetsiifiliste erinevuste tõttu tuleks DT40-rakkudes saadud tulemusi valideerida imetajate süsteemides.

Haigus
Kana bursaalne lümfoom
Sünonüümid
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Klassifikatsioon

Organism
Kana
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
B-raku
Tuumorigeenne
Jah, süngeneetsetel kanadel

04Tunnused

Viide
DT40 (Cytioni katalooginumber 305249)
NCBI maksukood
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Immunoglobuliin M
Valgu ekspressioon
Immunoglobuliin M
Onkogeenid
C-MYC
Viirused
Transformant: linnuleukoosi viirus (ALV)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i, 0,05 mM 2-merkaptoetanooli, 5% kanaserumit ja 10% trüptoosfosfaadipuljongit → 2-merkaptoetanool säilib keskkonnas vaid 2–3 päeva ja 37 °C juures 24 tundi – hoida valguse eest kaitstult
Dissotsiatsioonireaktiiv
Puudub
Kultuuri edasikasvatamine
Suspensioni rakud: Eemaldage rakud substraadilt, pipeteerides värske söötmega. Üksikute rakkude saamiseks passeerige suspensioon mitu korda läbi 22 gabariitnõela ja doseerige see uutesse kolvidesse.
Külvitihedus
2–4 × 10⁵ rakku/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Hy-Line SC
Doonori vanus
1 päev