Gå direkte til indholdet
Sygdom
Lymfom i kyllingens bursae
Synonymer
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Dokumenter

DT40

Cell line · Varenummer 305249

€0.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

DT40-cellelinjen stammer fra kylling (Gallus gallus) og anvendes primært som model til undersøgelse af B-cellebiologi og immunologi. DT40-cellerne, der stammer fra et bursallymfom forårsaget af fugleleukosevirus, er unikke på grund af deres høje grad af homolog rekombination, hvilket gør dem særligt værdifulde til undersøgelser af genmålretning. Denne egenskab muliggør effektive og præcise genetiske modifikationer, hvilket fremmer forskning inden for forskellige områder, herunder DNA-reparation, kromosomdynamik og genfunktion. DT40-celler udviser hurtig vækst og en stabil karyotype, hvilket er fordelagtige egenskaber for eksperimentel reproducerbarhed og konsistens. De anvendes i vid udstrækning til at undersøge mekanismerne bag immunoglobulin-genkonvertering og -diversificering, hvilket bidrager væsentligt til vores forståelse af det adaptive immunsystem. Desuden anvendes DT40-celler i farmakologisk forskning til at screene for potentielle terapeutiske forbindelser og til at analysere cellulære reaktioner på DNA-skader. Ud over deres anvendelser inden for immunologi og genetisk forskning spiller DT40-celler også en afgørende rolle i undersøgelsen af cellulære signalveje. De udgør et robust system til at analysere de forskellige proteiner og geners roller i signaltransduktion, apoptose og regulering af cellecyklussen. Den lette genetiske manipulation af DT40-celler kombineret med deres biologiske relevans gør dem fortsat til et afgørende redskab i biomedicinsk forskning. Det er dog vigtigt at bemærke, at resultater opnået i DT40-celler bør valideres i pattedyrssystemer på grund af artsspecifikke forskelle.

Sygdom
Lymfom i kyllingens bursae
Synonymer
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Klassificering

Organisme
Kylling
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast-lignende
Celletype
B-celle
Tumorfremkaldende
Ja, hos syngene kyllinger

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DT40 (Cytion-katalognummer 305249)
NCBI-skattenummer
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Immunoglobulin M
Proteinekspression
Immunoglobulin M
Onkogener
C-MYC
Vira
Transformant: Fugleleukosevirus (ALV)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt til mediet 10 % FBS, 0,05 mM 2-mercaptoethanol, 5 % kyllingeserum og 10 % tryptosfosfatbouillon → 2-mercaptoethanol er kun stabilt i mediet i 2–3 dage og 24 timer ved 37 °C – beskyt mod lys
Dissociationsreagens
Ingen
Oddyrkning
Suspension af celler: Fjern celler fra substratet ved at pipettere med frisk medium. For at få enkelte celler skal du føre suspensionen flere gange gennem en 22 gauge-nål og fordele den i nye kolber.
Såtæthed
2 til 4 × 10⁵ celler/ml
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Hy-Line SC
Donorens alder
1 dag