- Disease
- לימפומה של בלוטת הבורסל בעוף
- Synonyms
- DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40
Documents
DT40
Cell line · Product number 305249
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים DT40 נגזר מתרנגולת (Gallus gallus) ומשמש בעיקר כמודל לחקר הביולוגיה של תאי B והאימונולוגיה. תאי DT40, שמקורם בלימפומה בורסלית הנגרמת על ידי נגיף לוקוזיס עופות, ייחודיים בשל שיעור הרקומבינציה ההומולוגית הגבוה שלהם, מה שהופך אותם בעלי ערך רב במיוחד למחקרים בתחום מיקוד גנים. מאפיין זה מאפשר שינויים גנטיים יעילים ומדויקים, ומקל על המחקר בתחומים שונים, כולל תיקון ה-DNA, דינמיקה כרומוזומלית ותפקוד גנים. תאי DT40 מתאפיינים בצמיחה מהירה ובקריוטיפ יציב, תכונות המהוות יתרון לשחזור ולעקביות הניסויים. הם משמשים בהרחבה לחקר המנגנונים של המרת גנים של אימונוגלובולינים וגיוון גנטי, ותורמים באופן משמעותי להבנתנו את מערכת החיסון האדפטיבית. יתר על כן, תאי DT40 משמשים במחקר פרמקולוגי לסינון תרכובות טיפוליות פוטנציאליות ולניתוח תגובות תאיות לנזק ב-DNA. בנוסף ליישומיהם באימונולוגיה ובמחקר גנטי, תאי DT40 ממלאים תפקיד מכריע בחקר מסלולי איתות תאיים. הם מספקים מערכת איתנה לניתוח תפקידיהם של חלבונים וגנים שונים בהעברת אותות, באפופטוזיס ובוויסות מחזור התא. הקלות שבה ניתן לבצע מניפולציות גנטיות בתאי DT40, בשילוב עם הרלוונטיות הביולוגית שלהם, ממשיכה להפוך אותם לכלי חיוני במחקר הביו-רפואי. עם זאת, חשוב לציין כי ממצאים בתאי DT40 צריכים לעבור אימות במערכות של יונקים בשל הבדלים ספציפיים למינים.
- Disease
- לימפומה של בלוטת הבורסל בעוף
- Synonyms
- DT-40
- DT 40
- DT40B
- LSCC-DT40
02Classification
- Organism
- Chicken
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי לימפוציט
- Cell type
- תא B
- Tumourigenic
- כן, בתרנגולות סינגניות
04Identifiers
- Citation
- DT40 (מספר קטלוג Cytion 305249)
- NCBI TaxID
- 9031
- Cellosaurus
- CVCL_0249
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- אימונוגלובולין M
- Protein expression
- אימונוגלובולין M
- Oncogenes
- C-MYC
- Viruses
- טרנספורמנט: נגיף הלוקוזיס של עופות (ALV)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 10% FBS, 0.05 מ"מ 2-מרקפטואתנול, 5% סרום עוף, 10% מרק טריפטוז-פוספט → 2-מרקפטואתנול יציב במדיום למשך 2–3 ימים בלבד, ו-24 שעות בטמפרטורה של 37°C – יש להגן מפני אור
- Dissociation reagent
- אף אחד
- Subculturing
- תאים בתמיסה: הסר את התאים מהמצע באמצעות פיפטה עם מדיום טרי. כדי להשיג תאים בודדים, העבר את התמיסה מספר פעמים דרך מחט בקוטר 22 והעבר אותה לצלוחיות חדשות.
- Seeding density
- 2 עד 4 × 10⁵ תאים/מ"ל
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- Hy-Line SC
- Donor age
- יום אחד
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes