Pāriet uz saturu
Slimība
Vistas bursas limfoma
Sinonīmi
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Dokumenti

DT40

Cell line · Preces numurs 305249

€0.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DT40 šūnu līnija ir iegūta no vistas (Gallus gallus) un galvenokārt tiek izmantota kā modelis B šūnu bioloģijas un imunoloģijas pētījumiem. DT40 šūnas, kas cēlušās no putnu leikoze vīrusa izraisītas bursālās limfomas, ir unikālas savas augstās homoloģiskās rekombinācijas likmes dēļ, kas padara tās īpaši vērtīgas gēnu mērķēšanas pētījumos. Šī īpašība ļauj veikt efektīvas un precīzas ģenētiskas modifikācijas, atvieglojot pētījumus dažādās jomās, tostarp DNS reparācijā, hromosomu dinamikā un gēnu funkcijās. DT40 šūnām piemīt strauja augšana un stabils kariotips, kas ir izdevīgas īpašības eksperimentu atkārtojamībai un konsekvenci. Tās plaši izmanto, lai pētītu imūnglobulīnu gēnu konversijas un diversifikācijas mehānismus, kas ievērojami veicina mūsu izpratni par adaptīvo imūnsistēmu. Turklāt DT40 šūnas izmanto farmakoloģiskajos pētījumos, lai atlasītu potenciālos terapeitiskos savienojumus un analizētu šūnu reakcijas uz DNS bojājumiem. Papildus to pielietojumam imunoloģijā un ģenētiskajos pētījumos DT40 šūnas ir nozīmīgas arī šūnu signālceļu izpētē. Tās nodrošina stabilu sistēmu, lai izpētītu dažādu proteīnu un gēnu lomu signālu pārvadē, apoptozē un šūnu cikla regulācijā. Viegla ģenētiskā manipulācija ar DT40 šūnām, apvienojumā ar to bioloģisko nozīmīgumu, joprojām padara tās par būtisku instrumentu biomedicīniskajos pētījumos. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka DT40 šūnās iegūtie rezultāti ir jāapstiprina zīdītāju sistēmās, ņemot vērā sugu specifiskās atšķirības.

Slimība
Vistas bursas limfoma
Sinonīmi
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Klasifikācija

Organisms
Vistas gaļa
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs
Šūnu tips
B šūna
Tumorogēns
Jā, singēniskām vistām

04Identifikatori

Atsauce
DT40 (Cytion kataloga numurs 305249)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Imunoglobulīns M
Proteīnu ekspresija
Imunoglobulīns M
Onkogēni
C-MYC
Vīrusi
Transformants: putnu leikoze vīruss (ALV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolu, 5 % vistas serumu, 10 % triptosfosfāta buljonu → 2-merkaptoetanols barotnē ir stabils tikai 2–3 dienas un 24 stundas 37 °C temperatūrā — pasargāt no gaismas
Disociācijas reaģents
Neviens
Pārstādīšana
Suspensijas šūnas: Atdaliet šūnas no substrāta, pipetējot ar svaigu barotni. Lai iegūtu atsevišķas šūnas, suspensiju vairākas reizes izlaiž caur 22 collu adatu un iepilda jaunās kolbās.
Sēšanas blīvums
2 līdz 4 × 10⁵ šūnu/ml
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Hy-Line SC
Donora vecums
1 diena