- Slimība
- Vistas bursas limfoma
- Sinonīmi
- DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40
Dokumenti
DT40
Cell line · Preces numurs 305249
Pielāgošana / Ieteikumi
- DT40Cell line€0.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
DT40 šūnu līnija ir iegūta no vistas (Gallus gallus) un galvenokārt tiek izmantota kā modelis B šūnu bioloģijas un imunoloģijas pētījumiem. DT40 šūnas, kas cēlušās no putnu leikoze vīrusa izraisītas bursālās limfomas, ir unikālas savas augstās homoloģiskās rekombinācijas likmes dēļ, kas padara tās īpaši vērtīgas gēnu mērķēšanas pētījumos. Šī īpašība ļauj veikt efektīvas un precīzas ģenētiskas modifikācijas, atvieglojot pētījumus dažādās jomās, tostarp DNS reparācijā, hromosomu dinamikā un gēnu funkcijās. DT40 šūnām piemīt strauja augšana un stabils kariotips, kas ir izdevīgas īpašības eksperimentu atkārtojamībai un konsekvenci. Tās plaši izmanto, lai pētītu imūnglobulīnu gēnu konversijas un diversifikācijas mehānismus, kas ievērojami veicina mūsu izpratni par adaptīvo imūnsistēmu. Turklāt DT40 šūnas izmanto farmakoloģiskajos pētījumos, lai atlasītu potenciālos terapeitiskos savienojumus un analizētu šūnu reakcijas uz DNS bojājumiem. Papildus to pielietojumam imunoloģijā un ģenētiskajos pētījumos DT40 šūnas ir nozīmīgas arī šūnu signālceļu izpētē. Tās nodrošina stabilu sistēmu, lai izpētītu dažādu proteīnu un gēnu lomu signālu pārvadē, apoptozē un šūnu cikla regulācijā. Viegla ģenētiskā manipulācija ar DT40 šūnām, apvienojumā ar to bioloģisko nozīmīgumu, joprojām padara tās par būtisku instrumentu biomedicīniskajos pētījumos. Tomēr ir svarīgi atzīmēt, ka DT40 šūnās iegūtie rezultāti ir jāapstiprina zīdītāju sistēmās, ņemot vērā sugu specifiskās atšķirības.
- Slimība
- Vistas bursas limfoma
- Sinonīmi
- DT-40
- DT 40
- DT40B
- LSCC-DT40
02Klasifikācija
- Organisms
- Vistas gaļa
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atsperes
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Limfoblastiem līdzīgs
- Šūnu tips
- B šūna
- Tumorogēns
- Jā, singēniskām vistām
04Identifikatori
- Atsauce
- DT40 (Cytion kataloga numurs 305249)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9031
- Cellosaurus
- CVCL_0249
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- Imunoglobulīns M
- Proteīnu ekspresija
- Imunoglobulīns M
- Onkogēni
- C-MYC
- Vīrusi
- Transformants: putnu leikoze vīruss (ALV)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildiniet barotni ar 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolu, 5 % vistas serumu, 10 % triptosfosfāta buljonu → 2-merkaptoetanols barotnē ir stabils tikai 2–3 dienas un 24 stundas 37 °C temperatūrā — pasargāt no gaismas
- Disociācijas reaģents
- Neviens
- Pārstādīšana
- Suspensijas šūnas: Atdaliet šūnas no substrāta, pipetējot ar svaigu barotni. Lai iegūtu atsevišķas šūnas, suspensiju vairākas reizes izlaiž caur 22 collu adatu un iepilda jaunās kolbās.
- Sēšanas blīvums
- 2 līdz 4 × 10⁵ šūnu/ml
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Šķirne / pasuga
- Hy-Line SC
- Donora vecums
- 1 diena
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā