- Bolezen
- Limfom piščančje burze
- Sinonimi
- DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40
Dokumenti
DT40
Cell line · Številka izdelka 305249
Prilagajanje / Priporočila
- DT40Cell line€0.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celična linija DT40 izhaja iz piščanca (Gallus gallus) in se uporablja predvsem kot model za preučevanje biologije B-celic in imunologije. Celice DT40, ki izvirajo iz limfoma burze, povzročenega z virusom aviarne levkoze, so edinstvene zaradi visoke stopnje homologne rekombinacije, zaradi česar so še posebej dragocene za raziskave ciljnega vnašanja genov. Ta lastnost omogoča učinkovite in natančne genske modifikacije, kar olajšuje raziskave na različnih področjih, vključno s popravljanjem DNK, kromosomsko dinamiko in delovanjem genov. Celice DT40 se hitro razmnožujejo in imajo stabilen kariotip, kar sta prednosti za ponovljivost in doslednost poskusov. Široko se uporabljajo za preučevanje mehanizmov konverzije in diverzifikacije imunoglobulinskih genov, kar pomembno prispeva k našemu razumevanju adaptivnega imunskega sistema. Poleg tega se celice DT40 uporabljajo v farmakoloških raziskavah za presejanje potencialnih terapevtskih spojin in za analizo celičnih odzivov na poškodbe DNK. Poleg uporabe v imunologiji in genetskih raziskavah so celice DT40 ključne tudi pri preučevanju celičnih signalnih poti. Zagotavljajo zanesljiv sistem za razčlenjevanje vlog različnih beljakovin in genov pri signalni transdukciji, apoptozi in regulaciji celičnega cikla. Enostavnost genetske manipulacije v celicah DT40 v kombinaciji z njihovo biološko pomembnostjo jih še naprej uvršča med ključna orodja v biomedicinskih raziskavah. Vendar je pomembno opozoriti, da je treba ugotovitve, pridobljene na celicah DT40, zaradi vrstno specifičnih razlik potrditi v sistemih sesalcev.
- Bolezen
- Limfom piščančje burze
- Sinonimi
- DT-40
- DT 40
- DT40B
- LSCC-DT40
02Razvrstitev
- Organizem
- Piščanec
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Vzmetenje
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Limfoblastom podobni
- Vrsta celice
- Celica B
- Tumorigeničen
- Da, pri singenih piščancih
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- DT40 (kataloška številka Cytion 305249)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9031
- Cellosaurus
- CVCL_0249
05Izražanje in dovzetnost
- Izraženi receptorji
- Imunoglobulin M
- Ekspresija beljakovin
- Imunoglobulin M
- Onkogeni
- C-MYC
- Virusi
- Transformant: virus aviarne levkoze (ALV)
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojilno gojišče dopolnite z 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanola, 5 % piščančjega seruma in 10 % triptozo-fosfatne gojišče → 2-merkaptoetanol ostane stabilen v gojišču le 2–3 dni, pri 37 °C pa 24 ur – zaščitite pred svetlobo
- Reagenca za disociacijo
- Nič
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Suspenzijske celice: Odstranite celice s substrata s pipetiranjem s svežim gojiščem. Če želite dobiti posamezne celice, suspenzijo večkrat precedite skozi iglo 22 in jo razpršite v nove bučke.
- Gostota setve
- 2 do 4 × 10⁵ celic/ml
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Pasma / podvrsta
- Hy-Line SC
- Starost darovalca
- 1 dan
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da