Preskoči na vsebino
Bolezen
Limfom piščančje burze
Sinonimi
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Dokumenti

DT40

Cell line · Številka izdelka 305249

€0.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija DT40 izhaja iz piščanca (Gallus gallus) in se uporablja predvsem kot model za preučevanje biologije B-celic in imunologije. Celice DT40, ki izvirajo iz limfoma burze, povzročenega z virusom aviarne levkoze, so edinstvene zaradi visoke stopnje homologne rekombinacije, zaradi česar so še posebej dragocene za raziskave ciljnega vnašanja genov. Ta lastnost omogoča učinkovite in natančne genske modifikacije, kar olajšuje raziskave na različnih področjih, vključno s popravljanjem DNK, kromosomsko dinamiko in delovanjem genov. Celice DT40 se hitro razmnožujejo in imajo stabilen kariotip, kar sta prednosti za ponovljivost in doslednost poskusov. Široko se uporabljajo za preučevanje mehanizmov konverzije in diverzifikacije imunoglobulinskih genov, kar pomembno prispeva k našemu razumevanju adaptivnega imunskega sistema. Poleg tega se celice DT40 uporabljajo v farmakoloških raziskavah za presejanje potencialnih terapevtskih spojin in za analizo celičnih odzivov na poškodbe DNK. Poleg uporabe v imunologiji in genetskih raziskavah so celice DT40 ključne tudi pri preučevanju celičnih signalnih poti. Zagotavljajo zanesljiv sistem za razčlenjevanje vlog različnih beljakovin in genov pri signalni transdukciji, apoptozi in regulaciji celičnega cikla. Enostavnost genetske manipulacije v celicah DT40 v kombinaciji z njihovo biološko pomembnostjo jih še naprej uvršča med ključna orodja v biomedicinskih raziskavah. Vendar je pomembno opozoriti, da je treba ugotovitve, pridobljene na celicah DT40, zaradi vrstno specifičnih razlik potrditi v sistemih sesalcev.

Bolezen
Limfom piščančje burze
Sinonimi
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Razvrstitev

Organizem
Piščanec
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblastom podobni
Vrsta celice
Celica B
Tumorigeničen
Da, pri singenih piščancih

04Identifikatorji

Navajanje vira
DT40 (kataloška številka Cytion 305249)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Imunoglobulin M
Ekspresija beljakovin
Imunoglobulin M
Onkogeni
C-MYC
Virusi
Transformant: virus aviarne levkoze (ALV)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilno gojišče dopolnite z 10 % FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanola, 5 % piščančjega seruma in 10 % triptozo-fosfatne gojišče → 2-merkaptoetanol ostane stabilen v gojišču le 2–3 dni, pri 37 °C pa 24 ur – zaščitite pred svetlobo
Reagenca za disociacijo
Nič
Preusmeritev v drugo kulturo
Suspenzijske celice: Odstranite celice s substrata s pipetiranjem s svežim gojiščem. Če želite dobiti posamezne celice, suspenzijo večkrat precedite skozi iglo 22 in jo razpršite v nove bučke.
Gostota setve
2 do 4 × 10⁵ celic/ml
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Hy-Line SC
Starost darovalca
1 dan