Przejdź do treści
Choroba
Chłoniak kaletki maziowej
Synonimy
DT-40, DT 40, DT40B, LSCC-DT40

Dokumenty

DT40

Cell line · Numer produktu 305249

€0.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa DT40 pochodzi od kurczaka (Gallus gallus) i jest głównie wykorzystywana jako model do badania biologii komórek B i immunologii. Pochodzące z chłoniaka kaletki wywołanego wirusem białaczki ptaków, komórki DT40 są unikalne ze względu na wysoki wskaźnik rekombinacji homologicznej, co czyni je szczególnie cennymi w badaniach nad celowaniem genów. Cecha ta pozwala na wydajne i precyzyjne modyfikacje genetyczne, ułatwiając badania w różnych dziedzinach, w tym naprawy DNA, dynamiki chromosomów i funkcji genów. Komórki DT40 wykazują szybki wzrost i stabilny kariotyp, które są korzystnymi cechami dla powtarzalności i spójności eksperymentalnej. Są one szeroko wykorzystywane do badania mechanizmów konwersji i dywersyfikacji genów immunoglobulin, przyczyniając się znacząco do naszego zrozumienia adaptacyjnego układu odpornościowego. Co więcej, komórki DT40 są wykorzystywane w badaniach farmakologicznych do przesiewania potencjalnych związków terapeutycznych i analizowania odpowiedzi komórkowej na uszkodzenia DNA. Oprócz zastosowań w immunologii i badaniach genetycznych, komórki DT40 odgrywają również kluczową rolę w badaniu komórkowych szlaków sygnałowych. Stanowią one solidny system do badania roli różnych białek i genów w transdukcji sygnału, apoptozie i regulacji cyklu komórkowego. Łatwość manipulacji genetycznych w komórkach DT40, w połączeniu z ich biologicznym znaczeniem, nadal czyni je kluczowym narzędziem w badaniach biomedycznych. Należy jednak pamiętać, że wyniki uzyskane w komórkach DT40 powinny zostać zweryfikowane w systemach ssaków ze względu na różnice gatunkowe.

Choroba
Chłoniak kaletki maziowej
Synonimy
  • DT-40
  • DT 40
  • DT40B
  • LSCC-DT40

02Klasyfikacja

Organizm
Kurczak
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobne do limfoblastów
Typ komórki
Komórka B
Nowotworotwórczy
Tak, u kurcząt syngenicznych

04Identyfikatory

Źródło
DT40 (numer katalogowy Cytion 305249)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9031
Cellosaurus
CVCL_0249

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Immunoglobulina M
Ekspresja białek
Immunoglobulina M
Onkogeny
C-MYC
Wirusy
Transformant: Wirus białaczki ptaków (ALV)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Do pożywki należy dodać 10% FBS, 0,05 mM 2-merkaptoetanolu, 5% surowicy kurzej oraz 10% bulionu fosforanowo-tryptozowego → 2-merkaptoetanol zachowuje stabilność w pożywce jedynie przez 2–3 dni, a w temperaturze 37°C – przez 24 godziny; należy chronić przed światłem
Odczynnik dysocjacyjny
Brak
Hodowla komórek w subkulturze
Zawiesina komórek: Usunąć komórki z podłoża przez pipetowanie ze świeżą pożywką. Aby uzyskać pojedyncze komórki, przepuścić zawiesinę kilka razy przez igłę o rozmiarze 22 i dozować do nowych kolb.
Gęstość wysiewu
od 2 do 4 × 10⁵ komórek/ml
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Hy-Line SC
Wiek dawcy
1 dzień