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DOHH-2
Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Lymphome diffus à grandes cellules B
Synonymes
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Documents

DOHH-2

Cell line · Référence du produit 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

DOHH-2 est une lignée cellulaire humaine issue d’un lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL) utilisée pour modéliser divers aspects des hémopathies malignes à cellules B, notamment la résistance aux médicaments et l’efficacité thérapeutique. Cette lignée cellulaire est particulièrement utile pour évaluer l’impact des thérapies ciblées et des schémas thérapeutiques combinés sur la croissance tumorale. Des études ont montré que les cellules DOHH-2 répondent à l’inhibiteur de Bcl-2 ABT-263 (navitoclax), qui a été testé en association avec divers agents chimiothérapeutiques afin d’améliorer l’efficacité du traitement. Par exemple, l’ajout de l’ABT-263 à l’étoposide et à la vincristine s’est avéré produire des effets additifs sur la survie cellulaire et l’apoptose, démontrant ainsi son potentiel à améliorer les résultats dans les traitements combinés du DLBCL. Des modèles in vivo impliquant les cellules DOHH-2 montrent également que l’association de l’ABT-263 à des protocoles tels que le CHOP peut augmenter significativement les taux de réponse tumorale et retarder la croissance tumorale, soulignant ainsi son utilité dans les essais précliniques de médicaments.

Le DOHH-2 a également fait l’objet d’études portant sur sa réponse à diverses thérapies ciblées allant au-delà de la chimiothérapie traditionnelle. En particulier, la triple association de l’anticorps anti-CD20 obinutuzumab avec l’inhibiteur de Bcl-2 vénétoclax et l’inhibiteur de MDM2 idasanutlin a démontré une efficacité supérieure pour réduire la taille de la tumeur et obtenir une rémission complète dans des modèles précliniques. Cette approche met en évidence le rôle de la DOHH-2 dans le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques visant à obtenir un meilleur contrôle à long terme du LDGCB.

Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Lymphome diffus à grandes cellules B
Synonymes
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Suspension
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Identifiants

Référence
DOHH-2 (référence Cytion 305537)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Expression et sensibilité

Virus
Transformant : virus d'Epstein-Barr (EBV).

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Repiquage
Rassembler les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium (utiliser 3-5 ml pour les flacons T25 et 5-10 ml pour les flacons T75). Appliquer Accutase (1-2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à couvrir entièrement la couche cellulaire. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l'incubation, combiner et centrifuger la suspension et les cellules adhérentes. Après centrifugation, remettre soigneusement en suspension le culot cellulaire et transférer la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Densité de semis
3 à 5 × 10⁵/ml
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
60 ans
Origine ethnique
Caucasien