Ga naar de inhoud
DOHH-2
Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Diffuus groot B-cel lymfoom
Synoniemen
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Documenten

DOHH-2

Cell line · Productnummer 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

DOHH-2 is een menselijke cellijn van diffuus grootcellig B-cellymfoom (DLBCL) die wordt gebruikt om verschillende aspecten van B-celmaligniteiten te modelleren, waaronder geneesmiddelresistentie en de effectiviteit van behandelingen. Deze cellijn is met name waardevol voor het beoordelen van de invloed van gerichte therapieën en combinatietherapieën op de tumorgroei. Uit onderzoek is gebleken dat DOHH-2-cellen reageren op de Bcl-2-remmer ABT-263 (navitoclax), die in combinatie met diverse chemotherapeutische middelen is getest om de effectiviteit van de behandeling te verbeteren. Zo is bijvoorbeeld gebleken dat de toevoeging van ABT-263 aan etoposide en vincristine een versterkend effect heeft op de overleving van cellen en apoptose, wat het potentieel aantoont om de resultaten bij combinatietherapieën voor DLBCL te verbeteren. In-vivo-modellen met DOHH-2 tonen eveneens aan dat het combineren van ABT-263 met behandelingen zoals CHOP de tumorresponspercentages aanzienlijk kan verhogen en de tumorgroei kan vertragen, wat het nut ervan bij preklinische geneesmiddelentests onderstreept.

DOHH-2 is ook onderzocht op zijn reactie op diverse gerichte therapieën die verder gaan dan traditionele chemotherapie. Met name de drievoudige combinatie van het CD20-antilichaam obinutuzumab met de Bcl-2-remmer venetoclax en de MDM2-remmer idasanutlin toonde in preklinische modellen een superieure werkzaamheid aan bij het verkleinen van de tumorgrootte en het bereiken van volledige remissie. Deze aanpak benadrukt de rol van DOHH-2 bij het bevorderen van nieuwe therapeutische strategieën die gericht zijn op een betere langetermijnbeheersing van DLBCL.

Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Diffuus groot B-cel lymfoom
Synoniemen
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
DOHH-2 (Cytion-catalogusnummer 305537)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: Epstein-Barr-virus (EBV).

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Heruitplanten
Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
3-5 × 10⁵/ml
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
60 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch