Přejít na obsah
DOHH-2
Tkáň
Pleurální výpotek
Nemoc
Difuzní velkobuněčný B-lymfom
Synonyma
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Dokumenty

DOHH-2

Cell line · Číslo výrobku 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

DOHH-2 je lidská buněčná linie difúzního velkobuněčného B-buněčného lymfomu (DLBCL), která se používá k modelování různých aspektů malignit B-buněk, včetně rezistence na léčiva a účinnosti léčby. Tato buněčná linie je obzvláště cenná pro hodnocení vlivu cílených terapií a kombinovaných léčebných režimů na růst nádoru. Studie prokázaly, že buňky DOHH-2 reagují na inhibitor Bcl-2 ABT-263 (navitoclax), který byl testován v kombinaci s různými chemoterapeutickými látkami za účelem zvýšení účinnosti léčby. Bylo například zjištěno, že přidání ABT-263 k etoposidu a vinkristinu má aditivní účinky na přežití buněk a apoptózu, což dokládá jeho potenciál ke zlepšení výsledků v kombinované léčbě DLBCL. In vivo modely zahrnující buňky DOHH-2 rovněž ukazují, že kombinace ABT-263 s léčebnými režimy, jako je CHOP, může významně zvýšit míru odezvy nádoru a zpomalit jeho růst, což podtrhuje jeho užitečnost v předklinickém testování léčiv.

DOHH-2 byl rovněž zkoumán z hlediska své reakce na různé cílené terapie nad rámec tradiční chemoterapie. Zejména trojnásobná kombinace protilátky proti CD20 (obinutuzumab) s inhibitorem Bcl-2 (venetoklaks) a inhibitorem MDM2 (idasanutlin) prokázala v předklinických modelech vynikající účinnost při zmenšování velikosti nádoru a dosažení kompletní remise. Tento přístup zdůrazňuje roli DOHH-2 při rozvoji nových terapeutických strategií zaměřených na dosažení lepší dlouhodobé kontroly DLBCL.

Tkáň
Pleurální výpotek
Nemoc
Difuzní velkobuněčný B-lymfom
Synonyma
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
DOHH-2 (katalogové číslo Cytion 305537)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: virus Epsteina-Barra (EBV).

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Hustota výsevu
3–5 × 10⁵/ml
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
60 let
Etnická příslušnost
Kavkazský