الانتقال إلى المحتوى
DOHH-2
الأنسجة
الانصباب الجنبي
المرض
لمفومة الخلايا البائية الكبيرة المنتشرة
المرادفات
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

المستندات

DOHH-2

Cell line · رقم المنتج 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

DOHH-2 هو خط خلوي لليمفوما الخلايا البائية الكبيرة المنتشرة (DLBCL) لدى البشر، ويُستخدم لنمذجة جوانب مختلفة من الأورام الخبيثة للخلايا البائية، بما في ذلك مقاومة الأدوية وفعالية العلاج. ويُعد هذا الخط الخلوي ذا قيمة خاصة في تقييم تأثير العلاجات الموجهة وأنظمة العلاج المركبة على نمو الورم. وقد أظهرت الدراسات أن خلايا DOHH-2 تستجيب لمثبط Bcl-2 ABT-263 (navitoclax)، الذي تم اختباره بالاشتراك مع عوامل علاج كيميائي متنوعة لتعزيز فعالية العلاج. على سبيل المثال، تبيّن أن إضافة ABT-263 إلى إيتوبوسيد وفينكريستين تُحدث تأثيرات تراكمية على بقاء الخلايا وموت الخلايا المبرمج، مما يدل على قدرته على تحسين النتائج في العلاجات المركبة لـ DLBCL. كما تُظهر النماذج الحيوية التي تشمل DOHH-2 أن الجمع بين ABT-263 وأنظمة علاجية مثل CHOP يمكن أن يزيد بشكل كبير من معدلات استجابة الورم ويؤخر نموه، مما يؤكد فائدته في اختبار الأدوية قبل السريري.

كما تمت دراسة DOHH-2 لتقييم استجابته لمختلف العلاجات الموجهة التي تتجاوز نطاق العلاج الكيميائي التقليدي. وعلى وجه الخصوص، أظهر المزيج الثلاثي المكون من الجسم المضاد لـ CD20 أوبينوتوزوماب مع مثبط Bcl-2 فينيتوكلاكس ومثبط MDM2 إيداسانوتلين فعالية فائقة في تقليل حجم الورم وتحقيق الهدوء التام للمرض في النماذج ما قبل السريرية. ويسلط هذا النهج الضوء على دور DOHH-2 في تطوير استراتيجيات علاجية مبتكرة تهدف إلى تحقيق سيطرة أفضل على DLBCL على المدى الطويل.

الأنسجة
الانصباب الجنبي
المرض
لمفومة الخلايا البائية الكبيرة المنتشرة
المرادفات
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
DOHH-2 (رقم الكتالوج لدى شركة Cytion: 305537)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1179

04التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
الكائن المُحوَّل: فيروس إبشتاين-بار (EBV).

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
3-5*10^5/مل
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
60 عاماً
الأصل العرقي
قوقازي