Przejdź do treści
DOHH-2
Chusteczka
Wysięk opłucnowy
Choroba
Chłoniak rozlany z dużych komórek B
Synonimy
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Dokumenty

DOHH-2

Cell line · Numer produktu 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

DOHH-2 to ludzka linia komórkowa rozlanego chłoniaka wielkokomórkowego typu B (DLBCL), wykorzystywana do modelowania różnych aspektów nowotworów z komórek B, w tym oporności na leki i skuteczności leczenia. Linia ta jest szczególnie cenna przy ocenie wpływu terapii celowanych i schematów leczenia skojarzonego na wzrost guza. Badania wykazały, że komórki DOHH-2 reagują na inhibitor Bcl-2 ABT-263 (navitoklaks), który był testowany w połączeniu z różnymi środkami chemioterapeutycznymi w celu zwiększenia skuteczności leczenia. Na przykład stwierdzono, że dodanie ABT-263 do etopozydu i winkrystyny wywiera addytywny wpływ na przeżywalność komórek i apoptozę, co wskazuje na jego potencjał w zakresie poprawy wyników leczenia skojarzonego w przypadku DLBCL. Modele in vivo z wykorzystaniem komórek DOHH-2 pokazują również, że połączenie ABT-263 ze schematami takimi jak CHOP może znacząco zwiększyć wskaźniki odpowiedzi nowotworu i opóźnić jego wzrost, co podkreśla przydatność tego związku w przedklinicznych badaniach leków.

Badano również reakcję DOHH-2 na różne terapie celowane wykraczające poza tradycyjną chemioterapię. W szczególności potrójna kombinacja przeciwciała CD20 – obinutuzumabu – z inhibitorem Bcl-2 – wenetoklaksem oraz inhibitorem MDM2 – idasanutliną wykazała doskonałą skuteczność w zmniejszaniu rozmiarów guza i osiąganiu całkowitej remisji w modelach przedklinicznych. Podejście to podkreśla rolę DOHH-2 w rozwoju nowatorskich strategii terapeutycznych mających na celu osiągnięcie lepszej długoterminowej kontroli DLBCL.

Chusteczka
Wysięk opłucnowy
Choroba
Chłoniak rozlany z dużych komórek B
Synonimy
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
DOHH-2 (numer katalogowy Cytion 305537)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: wirus Epsteina-Barra (EBV).

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
3–5 × 10⁵/ml
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
60 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski