Siirry sisältöön
DOHH-2
Kudos
Pleuraeffuusio
Sairaus
Diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma
Synonyymit
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Asiakirjat

DOHH-2

Cell line · Tuotenumero 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

DOHH-2 on ihmisen diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma (DLBCL) -solulinja, jota käytetään B-solupahanlaatuisten kasvainten eri näkökohtien mallintamiseen, mukaan lukien lääkeresistenssi ja hoidon teho. Tämä solulinja on erityisen arvokas arvioitaessa kohdennettujen hoitojen ja yhdistelmähoitojen vaikutusta kasvaimen kasvuun. Tutkimukset ovat osoittaneet, että DOHH-2-solut reagoivat Bcl-2-inhibiittoriin ABT-263:een (navitoklaks), jota on testattu yhdessä erilaisten kemoterapeuttisten aineiden kanssa hoidon tehokkuuden parantamiseksi. Esimerkiksi ABT-263:n lisäämisen etoposidin ja vinkristiinin yhteyteen on havaittu tuottavan additiivisia vaikutuksia solujen eloonjäämiseen ja apoptoosiin, mikä osoittaa sen potentiaalin parantaa hoitotuloksia DLBCL:n yhdistelmähoidoissa. Myös DOHH-2-soluja käyttävät in vivo -mallit osoittavat, että ABT-263:n yhdistäminen CHOP:n kaltaisiin hoito-ohjelmiin voi merkittävästi lisätä kasvaimen vasteprosentteja ja hidastaa kasvaimen kasvua, mikä korostaa sen hyödyllisyyttä prekliinisissä lääketutkimuksissa.

DOHH-2:ta on tutkittu myös sen vasteen osalta erilaisiin kohdennettuihin terapioihin perinteisen kemoterapian lisäksi. Erityisesti CD20-vasta-aineen obinutuzumabin, Bcl-2-estäjän venetoklaksin ja MDM2-estäjän idasanutliinin kolmoisyhdistelmä osoitti ylivoimaista tehoa kasvaimen koon pienentämisessä ja täydellisen remission saavuttamisessa prekliinisissä malleissa. Tämä lähestymistapa korostaa DOHH-2:n roolia uusien hoitostrategioiden kehittämisessä, joiden tavoitteena on saavuttaa parempi DLBCL:n pitkäaikainen hallinta.

Kudos
Pleuraeffuusio
Sairaus
Diffuusi suurisoluinen B-solulymfooma
Synonyymit
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Tunnisteet

Lähdeviite
DOHH-2 (Cytionin tuotenumero 305537)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Transformantti: Epstein-Barr-virus (EBV).

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
3–5 × 10⁵/ml
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
60 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen